詳細(xì)介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:組織無機(jī)磷可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6796
分類:離子系列
商品介紹:
無機(jī)磷主要指磷酸根,參與生物體內(nèi)多種代謝,包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等等,此外促進(jìn)碳水化合物的合成、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)運(yùn)。
測定原理:
鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì),通過測定660nm光吸收,即可計算無機(jī)磷含量。
自備儀器和用品:
離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
電泳級丙溶液 ( 干粉型 )200mL 冷凍型血液 RNA 保存液100mL
電泳級甲叉雙丙 25g 酪蛋白50g
電泳級 TEMED1.5mL 昆蟲種屬鑒定 PCR Mix100 次
電泳級過0.1gx10 昆蟲細(xì)胞裂解液50mL
電泳級尿素100g 口腔角質(zhì)細(xì)胞生長因子5mL
抗凝血酶Ⅲ,10mg/mL1mL OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態(tài)細(xì)胞0.1 mL×10
APMSF 溶液,10mg/mL1mL Oligo(dT) 再生溶液100mL
抑制劑,10mg/mL10mL Oligo(dT) 纖維素25mg
抑氨肽酶,5mg/mL5mL Oligo 快速復(fù)性液,10×1mL
鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液,10mg/mL10mL Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg
超氧陰離子測試盒
超氧陰離子清除能力測試盒
橙黃決明素含量試劑盒
赤霉素(GA3)含量試劑盒
醇脫氫酶(ADH)測試盒
組織無機(jī)磷可見分光光度法測試盒Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )10L JM110 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )50L JM109 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )10L JC-11mg
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )50L JC-105mg
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)30 次 IPTG 溶液,200mg/mL1.5mL
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。