詳細介紹
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規(guī)格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
h-FABP Elisa Kit | 96T/48T | GOY-1176E |
樣品準備:
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好
控制在 5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值
大于標準品孔第一孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計
算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
人前列腺平滑肌細胞RNAHPSMC miRNA5 μg
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細胞裂解液 (陽性對照)
大額牛腎細胞;BFR-K1
Hce-8693細胞,人盲腸腺癌細胞(未分化) 人視網(wǎng)膜母細胞瘤,Rb細胞 人Burkkit淋巴瘤細胞;Daudi
HEp-2(人喉表皮樣癌細胞) 5×106cells/瓶×2
ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人細胞裂解液 (陽性對照)
人前列腺平滑肌細胞RNAHPSMC miRNA5 μg
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細胞裂解液 (陽性對照)
大額牛腎細胞;BFR-K1
Hce-8693細胞,人盲腸腺癌細胞(未分化) 人視網(wǎng)膜母細胞瘤,Rb細胞 人Burkkit淋巴瘤細胞;Daudi
HEp-2(人喉表皮樣癌細胞) 5×106cells/瓶×2
ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人細胞裂解液 (陽性對照)
CLEC2D Others Rat 大鼠 CLEC2D / OCIL 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-00086T-CEM (人T細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
滑膜細胞生長添加物SGS
PA-1細胞,人卵巢畸胎瘤細胞 Ad5DNA轉(zhuǎn)化的胚腎,HEK-293細胞 心肌細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)
山羊皮膚細胞;WGS1
S100B Others Human 人 S100B 人細胞裂解液 (陽性對照)
h-FABP人心型脂肪酸結(jié)合蛋白elisa應(yīng)用WB-S2 水牛牛皮膚成纖維樣細胞 1ml/T75
WB-S3 水牛牛皮膚成纖維樣細胞 1ml/T75
WB-S4 水牛牛皮膚成纖維樣細胞 1ml/T75
WB-S5 水牛牛皮膚成纖維樣細胞 1ml/T75
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。公司產(chǎn)品僅用于科研