詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:乙醇酸氧化酶紫外分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測(cè)試方法: 紫外分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6995
分類:光合作用系列
商品介紹:
乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.1)是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶,也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,對(duì)研究光呼吸代謝過(guò)程及其調(diào)控具有重要意義。
測(cè)定原理
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和鹽酸苯肼反應(yīng)生成乙醛酸苯腙,在324nm有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1mL石英比色皿。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
Ⅰ型膠原抗體 受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶3抗體
Ⅴ型膠原抗體 受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體
Ⅹ型膠原抗體 受體激活蛋白激酶C1抗體
氧化酶10抗體 受體活性修飾蛋白3抗體
甲狀腺受體相互作用蛋白15抗體 受體活性修飾蛋白2抗體
大鼠血紅蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠血紅素結(jié)合蛋白(HPX)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠血紅素氧合酶1(HO1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)elisa檢測(cè)試劑盒
乙醇酸氧化酶紫外分光光度法測(cè)試盒15mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個(gè) 硫酸新霉素干粉1g
15mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個(gè) 硫酸慶大霉素溶液 ,15mg/mL2mL
15mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個(gè) 硫酸葡聚糖1g
15mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)1個(gè) 硫酸溶液 ,50mg/mL10mL
柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次 硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!