詳細(xì)介紹
豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Porcine Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
英文名稱: Porcine Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
Decitabine 地西他濱- 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷 25mg 支
豬臟器組織淋巴細(xì)胞分離液試劑盒 200ml/KIT 盒
細(xì)胞過濾篩(不銹鋼) 60目 個(gè)
4×SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(PH=6.8) 500ml 瓶
EDTA抗原修復(fù)液(1×) 100ml 瓶
羊抗小鼠IgG-HRP 0.1ml 支
人白蛋白-FITC 0.5ml 支
革蘭氏陽性菌質(zhì)粒大量提取試劑盒 10T 盒
D2000 DNA Ladder 100T 支
2×Taqman PCR MasterMix 200T 支
Nacl-Peptone Buffer(pH7.0) PH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液 250g 瓶
L-Histidine L-組氨酸 25g 瓶
Laccase 漆酶 1g 瓶
輔酶
Sitagliptin 西他列汀 100mg 瓶
Bromothymol Blue 溴百里酚藍(lán) 25g 瓶
結(jié)晶紫染色液(2.5%) 100ml 瓶
活性氧檢測試劑盒 100T 盒
CAPS 3-(環(huán)己胺)-1-丙磺酸 100g 瓶
Ferric Cltrate 檸檬酸鐵 100g 瓶
DM130大孔吸附樹脂 500g 瓶
(TCEP) 三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽 1g 瓶
Sodium 5-nitroguaiacolate 5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉 25g 瓶
ethyl-2,4-dimethyl-Thiazole-5-Carboxylate (250 mg) 2,4-dimethyl-5-thiazolecarboxylic acid, ethyl ester; ethyl-2,4-dimethyl-Thiazole-5-Carboxylate
RG-108 (50 mg) α-(1,3-dihydro-1,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-(αS)-1H-indole-3-propanoic acid; N-Phthalyl-L-Tryptophan; RG-108
Milrinone (100 mg) 1,6-dihydro-2-methyl-6-oxo-[3,4’-bipyridine]-5-carbonitrile; Primacor |WIN 47,203; Milrinone
3-bromo-5-phenyl Salicylic Acid (10 mg) 5-bromo-4-hydroxy-[1,1’-biphenyl]-3-carboxylic acid; NSC 109116; 3-bromo-5-phenyl Salicylic Acid
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E1 (1 mg) 9,15-dioxo-11。alpha。-hydroxy-prostan-1-oic acid; 13,14-dihydro-15-keto PGE1; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E1
3-Deazaneplanocin A (500 ug) 5R-(4-amiH-imidazo[4,5-c]pyridin-1-yl)-3-(hydroxymethyl)-3-cyclopentene-1S,2R-diol; NSC 617989|DZNep; 3-Deazaneplanocin A
Prostaglandin E2 methyl ester (500 ug) 9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; PGE2 methyl ester|Dinoprostone methyl ester; Prostaglandin E2 methyl ester
Prostaglandin E3 (50 ug) 9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E,17Z-trien-1-oic acid; PGE3; Prostaglandin E3
Prostaglandin F2α 1,15-lactone (5 mg) 9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, 1,15-lactone; PGF2α 1,15-lactone; Prostaglandin F2α 1,15-lactone
1豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法5(R)-15-methyl Prostaglandin F2α methyl ester (50 mg) 9。alpha。,11。alpha。,15R-trihydroxy-15-methyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; 15(R)-15-methyl PGF2α methyl ester; 15(R)-15-methyl Prostaglandin F2α methyl ester
Tea Polyphenols 茶多酚 5g 瓶
10ml親和層析柱 (1.5×8) 10ml 個(gè)