詳細(xì)介紹
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
本試劑盒是由熱啟動(dòng)酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+以及PCR穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑等組成的預(yù)混體系,本產(chǎn)品使用簡(jiǎn)便,無需事先提純可直接用血液為模板擴(kuò)增目的基因,可有效擴(kuò)增高GC含量的模板和引物。 保存:-20℃,避免反復(fù)凍融。 |
下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
Blood Direct PCR Kit | 50μl×40次|50μl×200次 | GOY-F10314 |
DNA提取流程圖:
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
甲型流感H3N2HA1 英文名稱: Influenza A H3N2 HA1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: H3N2 HA1 Przewaquinone A 中文名:紫丹參甲素 分子式:C19H18O4
甲型流感H1N1 英文名稱: Influenza A H1N1(Swine Flu 2009) HA 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: H1N1 HA Prosapogenin A 19057-67-1 中文名:薯蕷次皂苷A 分子式:C39H62O12
甲型肝炎病毒抗體IgG 英文名稱: Human Hepatitis A Virus IgG 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: HAV IgG n-Tritriacontan-16,18-dione 24514-86-1 中文名: 分子式:C33H64O2 度:% 關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
甲型副傷(SPA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Topiramate 97240-79-4 中文名:托吡酯 分子式:C12H21NO8S
家蠶卵黃蛋白elisa試劑盒 家蠶卵黃蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 家蠶卵黃蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:家蠶卵黃蛋白試劑盒、家蠶卵黃蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid 中文名: 分子式:C13H16O5
AV-951 Tivozanib, AV951 質(zhì)量規(guī)格:>98%,VEGFR抑制劑 人胰脂肪酶(PL)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPancreaticLipase,PLELISAKit 96T/48T
7,8-二氫生物蝶呤 7,8-Dihydro-L-biopterin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,BR 大鼠細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)試劑盒 Rat Cytotoxic T Lymphocyte Associated Aigen 4,CTLA-4 ELISA Kit
整形素 Chlorflurenol-methyl 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR 英文名稱RatoponinIELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTnI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
帕拉米韋三水合物 Peramivir Trihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 海洋動(dòng)物(蝦貝類)線粒體粗提分離試劑盒10/50
神經(jīng)保護(hù)劑NXY059 NXY-059,Cerovive 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR ELISAKitFPA人血纖肽/纖維蛋白肽A規(guī)格:48T/96T
L-犬尿(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Kynurenine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌肌酸激酶(CKM)ELISA試劑盒 ,英文名: CKM ELISA Kit
磺胺二甲氧嗪; 磺胺二甲氧基 Sulfadimethoxine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 人胰(PAMY)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPancreaticAmylase,PAMYELISAKit 96T/48T
磺胺二甲氧基(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfadimethoxine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)因子BAX(BAX)試劑盒 Rat Apoptosis regulator BAX,BAX ELISA kit
奧斯他偉酸;羧酸 Oseltamivir acid 質(zhì)量規(guī)格:>97,BR 英文名稱RatcardiacoponinIELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTNI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
alpha-熊果苷(標(biāo)準(zhǔn)品) alpha-Arbutin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 海洋動(dòng)物種系18sRNA基因擴(kuò)增分析試劑盒20
血液直接PCR擴(kuò)增試劑盒體液氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
體液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
血液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。