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        1. 產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

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          上海谷研實業(yè)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>核酸擴(kuò)增>>5ml快速實時熒光定量PCR預(yù)混體系

          快速實時熒光定量PCR預(yù)混體系

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          • 快速實時熒光定量PCR預(yù)混體系

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          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 型號 5ml
          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

          在線詢價 收藏產(chǎn)品 加入對比 查看聯(lián)系電話

          更新時間:2022-04-22 14:38:58瀏覽次數(shù):334

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 GOY-F10298
          應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
          快速實時熒光定量PCR預(yù)混體系公司正*的各種產(chǎn)品細(xì)胞CDK5/P25激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
          組織CDK5/P25激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
          細(xì)胞CDK5/P35激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
          組織CDK5/P35激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
          細(xì)胞CDK6/CYC D1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

          本品是專用于染料法(SYBR Green)實時熒光定量PCR的預(yù)混體系,濃度為2×,包含Fast Taq DNA   Polymerase、PCR BufferdNTPsSYBR Green I熒光染料和Mg2+,操作簡單方便。主要用于基因組DNA靶序列和RNA反轉(zhuǎn)錄后的cDNA靶序列檢測。本品所含熒光染料SYBR Green I可以與所有的雙鏈DNA相結(jié)合,使該產(chǎn)品可用于不同靶序列的檢測而不需合成特異性標(biāo)記探針。本品含有的Fast Taq DNA   Polymerase能有效減少在常溫條件下由引物和模板非特異性結(jié)合或引物二聚體而產(chǎn)生的非特異性擴(kuò)增,酶的激活僅需在95℃孵育20s。整個PCR反應(yīng)過程比普通反應(yīng)可節(jié)省約40分鐘,大大縮短了PCR的反應(yīng)時間。*的PCR緩沖體系與熱啟動酶的組合,有效抑制了非特異產(chǎn)物的產(chǎn)生,并顯著提高PCR的擴(kuò)增效率。該產(chǎn)品應(yīng)用范圍廣,適用于普通和快速定量PCR程序,可適用于無需ROX校正的所有熒光定量PCR儀。

          ??ROX染料用于校正定量PCR儀孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 擴(kuò)增儀。不同儀器的激發(fā)光學(xué)系統(tǒng)有所不同,因此ROX染料的濃度必須與相應(yīng)的熒光定量PCR儀相匹配。

          注意事項:

          1、使用前請上下顛倒輕輕混勻,盡量避免起泡,并經(jīng)短暫離心后使用。

          2、本產(chǎn)品中含有熒光染料SYBR Green I,保存本產(chǎn)品或配制PCR反應(yīng)液時應(yīng)避免強(qiáng)光照射。

          3、避免反復(fù)凍融本品,反復(fù)凍融可能使產(chǎn)品性能下降。本產(chǎn)品長期保存可置于-20℃,避光。如果在短期內(nèi)需要頻繁使用,可在28℃保存。

          4、本品不能用于探針法熒光定量PCR。

          儲存條件:-20℃,避免反復(fù)凍融

          下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

          中文名稱

          英文名稱

          產(chǎn)品規(guī)格

          貨號

          快速實時熒光定量PCR預(yù)混體系

          BaFaSYBR   Mixture

          5ml

          GOY-F10298

           

          DNA提取流程圖:
          QQ截圖20220414142532.png
          實驗步驟
          (1)
          實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
          (2)
          取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
          (3)65
          水浴3-10 min,期間混勻2-3
          (4)
          加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
          (5)
          取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
          (6)
          加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
          (7)10,000rpm,4
          離心20min
          (8)
          棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
          (9)
          ::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
          (10)
          2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
          (11)12,000rpm,4
          離心20 min
          (12)
          棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
          (13)
          200ulDEPC處理水溶解
          (14)
          用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
          (
          在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
          腦膜炎奈瑟菌通用型(NM-U)核酸檢測試劑盒   48T                 3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol  中文名:3-乙酰基-5α-雄烷二  分子式:C21H34O3 

          納米二氧化鈦                    Ribavirin  36791-04-5  中文名:利巴韋林  分子式:C8H12N4O5 

          莫氏立克次體(RM)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T                 3-Amino-3-phenylpropionic acid  中文名:C9H11NO2  分子式:C9H11NO2 

          膜聯(lián)蛋白5   英文名稱:   Annexin 5   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   ANXA-5  3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one  中文名:  分子式:C29H48O2 

          膜聯(lián)蛋白2   英文名稱:   Annexin 2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   ANXA-2  Otophylloside B  中文名:青陽參苷B  分子式:C49H78O16
          虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Polydatin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatThromboxaneB2,TXB2ELISAKit大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          十八烷,1-十八(標(biāo)準(zhǔn)品)  1-Octadecanol  質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 LOWRY蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒100

          十八烷,1-十八  1-Octadecanol  質(zhì)量規(guī)格:>98% Porcineacetylcholine,ACHELISA試劑盒豬乙酰(ACh)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          Ruxolitinib (INCB018424)  Ruxolitinib (INCB018424)  質(zhì)量規(guī)格:>99% 小鼠基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA試劑盒 ,英文名: HEXβ ELISA Kit

          MK-1775,MK1775   MK-1775  質(zhì)量規(guī)格:>98%,Wee1激酶抑制劑 人胸腺肽(Thymosin)ELISA檢測試劑盒HumahymosinELISAKit 96T/48T

          PD184352 (CI-1040)  PD-184352 (CI-1040)  質(zhì)量規(guī)格:>99%,MEK1/2抑制劑 大鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)試劑盒 Rat keratinocyte aocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit

          2-脫氧-D-葡萄糖  2-Deoxy-D-glucose  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱RatSubstancePELISAKit大鼠P物質(zhì)(SP)規(guī)格:96T/48T

          坎地沙坦  Candesartan  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)  咖啡乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20

          Ruxolitinib(INCB018424) phosphate  INCB018424) phosphate  質(zhì)量規(guī)格:>98%,JAK1/2抑制劑 ELISAKitDyn人強(qiáng)啡肽規(guī)格:48T/96T

          SB1317,TG02  SB-1317,TG-02  質(zhì)量規(guī)格:>97%,CDKs/JAK2 / FLT3抑制劑 小鼠基己糖苷酶Aα(HEXα)ELISA試劑盒 ,英文名: HEXα ELISA Kit
          快速實時熒光定量PCR預(yù)混體系細(xì)胞半胱-3CASPASE-3)活性比色法定量檢測試劑盒

          組織半胱-2CASPASE-2)活性熒光定量檢測試劑盒

          細(xì)胞半胱-2CASPASE-2)活性熒光定量檢測試劑盒

          組織半胱-2CASPASE-2)活性比色法定量檢測試劑盒

          細(xì)胞半胱-2CASPASE-2)活性比色法定量檢測試劑盒
          操作步驟:
          1.
          勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
          b.
          單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染。
          c
          .細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
          2
          .將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
          3
          .可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
          5.
          每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
          6. 2-8
          10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
          7.
          把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
          8. 2-8
          10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。


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