詳細(xì)介紹
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
PCR Mix Dye | 10mL | GOY-F10268 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
本產(chǎn)品可加入到PCR反應(yīng)液中,使PCR產(chǎn)物可直接上樣電泳,其分子量相當(dāng)于50bp大小的DNA片段,不干擾觀察。 注:本產(chǎn)品不是PCR熒光染料,是一類可見光染料(類似電泳用的溴酚藍(lán),二甲苯藍(lán)等指示劑) 儲存條件:低溫運輸和-20℃保存、有效期一年。 |
DNA提取流程圖:
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
人纖維蛋白(FBL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit 3,5-Di-O-caffeoylquinic acid 中文名:異綠原酸A 分子式:C25H24O12 度:98.0%
人纖溶抑制因子(TAFI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit 3,6-Bis(hydroxymethyl)durene 7522-62-5 中文名:3,6-雙(羥甲基)杜烯 分子式:C12H18O2
人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白elisa試劑盒 人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒、人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one 1521197-43-2 中文名: 分子式:C16H15ClN4O
人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISAKit 2-Aminophenyl phenyl sulfide 1134-94-7 中文名:2-氨基二苯硫醚 分子式:C12H11NS
人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISAKit 2-Aminonicotinic acid 中文名:2-氨基 分子式:C6H6N2O2 度:98.0%
SB 203580 SB203580 質(zhì)量規(guī)格:>98%,p38 MAPK抑制劑 英文名稱RatThromboxaneB2ELISAKit大鼠血栓素(TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
6-氨基-3-甲基嘌呤(3MA);細(xì)胞自噬抑制劑 3-MA;6-Amino-3-methylpurine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,autophagy inhibitor 寡核苷酸探針非同位素HRP化學(xué)發(fā)光法DNA斑點雜交*試劑盒5
;2,6-二羥基嘌呤; 2,6-Dihydroxypurine;Xanthine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR ELISAKitIGFBP-3人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3規(guī)格:48T/96T
Necrostatin1 Necrostatin-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,RIP1抑制劑 小鼠7(KLK7)ELISA試劑盒 ,英文名: KLK7 ELISA Kit
大豆分離蛋白 Soy protein isolate 質(zhì)量規(guī)格:蛋白含量≥90%,BR 人遲現(xiàn)抗原(VLA)ELISA檢測試劑盒Humanverylateappearingaigen,VLAELISAKit 96T/48T
L-甲狀鈉鹽五水化合物 L-Thyroxine Salt Pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠心肌肌鈣蛋白C(TnC)試劑盒 Rat Cardiac oponin C,cTn-C ELISA kit
LY2940680 LY2940680 質(zhì)量規(guī)格:>98% 英文名稱RatTpPELISAKit大鼠血栓前體蛋白(TpP)。規(guī)格:96T/48T
LY2886721 LY-2886721 質(zhì)量規(guī)格:>98,BACE1 inhibitor 寡核苷酸探針非同位素HRP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交*試劑盒5
利尼伐尼;ABT869 Linifanib (ABT-869) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,VEGFR/PDGFR抑制劑 ELISAKitIGFBP2人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2規(guī)格:48T/96T
頭孢匹林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefapirin 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠5(KLK5)ELISA試劑盒 ,英文名: KLK5 ELISA Kit
PCR Mix染料(正鐵-氧化還原酶)活性定量檢測試劑盒
動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV
動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物III(-還原酶)活性
動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-還原酶)活性定量檢測試劑盒
動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-還原酶)活性定量檢測試劑盒