詳細(xì)介紹
下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
Mineral oil | 20ml | GOY-F10275 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
本品為礦物油,也叫石蠟油,可用于PCR或其它酶反應(yīng)等液面的封閉,本品密度為密度為0.838-0.854g/ml。 儲(chǔ)存條件:室溫。 |
DNA提取流程圖:
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過(guò)夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過(guò)TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見(jiàn)后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
人膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit 3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one 中文名: 分子式:C10H10O3 度:97.0%
人酶VB(CA5B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CA5B (Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial) ELISA Kit 2-Aminofluorene 中文名:2-氨基芴 分子式:C13H11N 度:99.0%
人瘤病毒58(HPV-58)ELISA試劑盒 3-(Hydroxymethyl)-3-nitro-1-(4-octylphenyl)-1,4-butanediol 中文名: 分子式:C19H31NO5 度:98.0%
人瘤病毒18(HPV-18)ELISA試劑盒 3-(Hydroxymethyl)-3-nitro-1-(4-octylphenyl)-1,4-butanediol 中文名: 分子式:C19H31NO5
人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 英文名稱(chēng): soluable ansferritin receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): sTFeR Rivaroxaban 中文名: 分子式:C19H18ClN3O5S
乳清酸 Orotic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),BR 大鼠γ氨基(GABA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 96T/48T
氟尼酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Niflumic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(FGF6)試劑盒 Human FGF6 ELISA kit
木聚糖 XYLAN 質(zhì)量規(guī)格:>95%,來(lái)源于玉米芯,溶于水 RatSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
阿特拉津,莠去津 Atrazine 質(zhì)量規(guī)格:>97% ISCOVE’SMDM培養(yǎng)基1/10升(片劑)
丁苯羥酸 Bufexamac 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR PlaGibberellicAcid,GAELISA試劑盒植物赤(GA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3-甘油酸激酶 3-Phosphoglyceric Phosphokinase 質(zhì)量規(guī)格:1000u/mg,Sigma分裝 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)ELISA試劑盒 ,英文名: SDF-1α/SDF1A ELISA Kit
1,5-二-D-核酮糖/1,5二核酮糖 d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP 質(zhì)量規(guī)格:90.0%,Sigma 大鼠乙酰受體抗體(AChRab)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 96T/48T
酸性蛋白酶;蛋白酶來(lái)自佐氏曲霉 Acidic Protease from Aspergillus 質(zhì)量規(guī)格:BR,50u/mg 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(FGF4)試劑盒 Human FGF4 ELISA kit
撲草凈 Prometryn 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR RatSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蘿卜硫素;萊菔硫烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulforaphane 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 JM109電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌5X100微升
礦物油(石蠟油)組織a-(a-AMYLASE)活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞a-(a-AMYLASE)活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)菌β-(β-AMYLASE)活性DNS比色法定量檢測(cè)試劑盒
真菌/酵母β-(β-AMYLASE)活性DNS比色法定量檢測(cè)試劑盒
植物β-(β-AMYLASE)活性DNS比色法定量檢測(cè)試劑盒