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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
本品是常用的檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針之一。用于細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(cè)時(shí)，Fluo-3 AM的常用濃度為0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fluo-3 AM適當(dāng)溶液和細(xì)胞一起在20-37℃孵育15-60分鐘進(jìn)行熒光探針裝載，隨后適當(dāng)洗滌，洗滌后可以考慮適當(dāng)再孵育20-30分鐘以確保Fluo-3 AM在細(xì)胞內(nèi)*轉(zhuǎn)變成Fluo-3。本Fluo-3 AM (鈣離子熒光探針) 是配制于無水DMSO中的儲(chǔ)存液，濃度為5mM。 分子式：C51H50Cl2N2O23 分子量：1129.85 Fluo-3和Fura-2相比，其優(yōu)點(diǎn)是：一方面可以被氬離子激光(argon-ion laser)的488nm激發(fā)光激發(fā)，便于檢測(cè)；另一方面，Fluo-3和鈣離子結(jié)合后熒光變化更強(qiáng)，即對(duì)鈣離子濃度變化的檢測(cè)更加靈敏；同時(shí)，Fluo-3和鈣離子的結(jié)合能力較弱，這樣可以比Fura-2檢測(cè)到細(xì)胞內(nèi)更高濃度的鈣離子水平；此外，對(duì)于細(xì)胞內(nèi)的鈣離子的即時(shí)變化反應(yīng)得更加準(zhǔn)確，減小了因?yàn)楹外}離子解離速度慢而導(dǎo)致的熒光變化滯后。 注意事項(xiàng)： 1. 本Fluo-3 AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。 2. 熒光染料均存在淬滅問題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期6個(gè)月。 |
下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
Intracellular calcium fluorescence probe | 20微升 | GOY-F10142 |
DNA提取流程圖：
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
兔血小板活化因子(rabbit PAF) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Formyl-2-furylboronic acid 27329-70-0 中文名： 分子式：C5H5BO4 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
兔血小板活化因子(rabbit PAF) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole 116856-18-9 中文名： 分子式：C7H9N3O3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
兔血小板活化因子 英文名稱： Rabbit Platelet Activating Factor 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： PAF 4-Hydroxysapriparaquinone 中文名： 分子式：C20H26O4 度：%
兔血纖蛋白原elisa試劑盒 兔血纖蛋白原試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔血纖蛋白原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔血纖蛋白原試劑盒、兔血纖蛋白原elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid 22252-43-3 中文名： 分子式：C8H10N2O3S
兔血纖蛋白原(Fbg)ELISAKit 4-Aminobutyric acid 中文名：4-氨基丁酸 分子式：C4H9NO2
甲基反亞油酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl linolelaidate 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitITGαM/CD11b人整合素αM型規(guī)格：48T/96T
肉豆蔻酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) Methyl myristate 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 小鼠亮酸豐富α2-糖蛋白1(LRG1)ELISA試劑盒 ，英文名： LRG1 ELISA Kit
棕櫚酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)) Methyl palmitate 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC) 人不對(duì)稱二甲基精(ADMA)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanasymmeicaldimethylarginine,ADMAELISAKit 96T/48T
亞麻酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl linolenate 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子B(PDGF-B)試劑盒 Rat platelet-derived growth factor-B,PDGF-B ELISA Kit
十一酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl undecanoate 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatHistoneDeacetylaseELISAKit大鼠組織蛋白去乙?；?/span>(HD)規(guī)格：96T/48T
十九酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl nonadecanoate 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 鈣離子膜通道鈣交換體(NCX/內(nèi)質(zhì)網(wǎng))功能熒光檢測(cè)試劑盒20
丙二酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Malonate 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitIegrinαⅤβ3人整合素αⅤβ3規(guī)格：48T/96T
D-異抗壞血酸(標(biāo)準(zhǔn)品) D-(?)-Isoascorbic acid 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)ELISA試劑盒 ，英文名： CTNNβ1 ELISA Kit
亞油酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)) Linoleic acid 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC) 人補(bǔ)體片斷5b(C5b)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanComplemefragme5b,C5bELISAKit 96T/48T
隱色結(jié)晶紫(標(biāo)準(zhǔn)品) Leucocrystal Violet 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA kit
細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光探針(Fluo-3 AM)組織C-KIT激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
細(xì)胞C-KIT激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
組織BTK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
細(xì)胞BTK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
組織BMK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí)，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
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