詳細(xì)介紹
下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
Chloride ion fluorescence probe | 20mg | GOY-F10141 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
本品是使用廣泛的一種新型氯離子熒光探針。MQAE的檢測(cè)靈敏度比SPQ更高,并且熒光效果也比SPQ要好一些,是一種目前廣泛應(yīng)用的新型氯離子熒光探針。 CAS:162558-52-3 分子式:C14H16BrNO3 分子量:326.19 性狀:黃色粉末 溶解性:可以溶解于DMSO,在水中的溶解度也較高。 MQAE以溴離子為配對(duì)陰離子,大激發(fā)波長(zhǎng)約為355nm,大發(fā)射波長(zhǎng)約為460nm。當(dāng)氯離子濃度升高時(shí),MQAE的熒光強(qiáng)度隨著氯離子濃度的增加而成比例地減少。在氯離子濃度低于50mM時(shí),MQAE的熒光強(qiáng)度幾乎不受pH變化的影響。 MQAE的工作液可以配制于Krebs-HEPES緩沖液中。Krebs-HEPES緩沖液即為20mM HEPES,128mM NaCl,2.5mM KCl,2.7mM CaCl2,1mM MgCl2,16mM glucose,pH7.4。MQAE標(biāo)記細(xì)胞時(shí)的濃度通常為5-10mM。以約800-1000萬(wàn)細(xì)胞每毫升的細(xì)胞密度,在含有5-10mM MQAE的Krebs-HEPES緩沖液中孵育30-60分鐘。通常一個(gè)探針的裝載體系為100微升即可。隨后用Krebs-HEPES緩沖液或其它適當(dāng)溶液洗滌5次左右,即可進(jìn)行相應(yīng)熒光測(cè)定。 注意事項(xiàng):熒光染料均存在淬滅問題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 儲(chǔ)存條件:4℃,有效期12個(gè)月。 |
DNA提取流程圖:
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三)-N(4)-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 度:98.0%
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISAKit 5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal 中文名: 分子式:C21H32O3
兔氧化低密度脂蛋白 英文名稱: Rabbit oxidized Low Density Lipoprotein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: oxLDL Pemetrexed 137281-23-3 中文名:培美曲塞二鈉 分子式:C20H21N5O6
兔血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三)-N(4)-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7
兔血小板衍化生長(zhǎng)因子(rabbit PDGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Fluorouracil 中文名: 分子式:C4H3FN2O2 度:98.0%
聚酰胺粉(柱層析用,10-30目) Polyamide 質(zhì)量規(guī)格:柱層析用,10-30目 大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA檢測(cè)試劑盒RatProgesterone,PROGELISAkit 96T/48T
氫二鈉,二水(for HPLC, ≥99%(T)) phosphate dibasic dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC, ≥99%(T) 人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒 Human HIF-1α ELISA Kit
無水硫酸鈉(農(nóng)殘級(jí)) sulfate anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:農(nóng)殘級(jí) Ratniicoxide,NOELISAKit大鼠(NO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
無水硫酸鈉(for HPLC,≥99.0%(T)) sulfate anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%(T) ERK蛋白共沉淀分析試劑盒5
(for HPLC,≥99.0%) bicarbonate 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0% MouseRetinol-bindingprotein4,RBP-4ELISA試劑盒小鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
四丁基化銨(離子對(duì)色譜級(jí)) Tetrabutylammonium iodide 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜級(jí) 小鼠亮酸豐富重復(fù)LGI家族成員3(LGI3)ELISA試劑盒 ,英文名: LGI3 ELISA Kit
三辛胺(離子對(duì)試劑) Trioctylamine 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)試劑 人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit 96T/48T
草酸鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(0.05M) oxalate solution 質(zhì)量規(guī)格:0.05M 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)試劑盒 Rat platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB ELISA Kit
剛果紅(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC)) Congo red 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC) 英文名稱RatHistoneDeacetylaseELISAKit大鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)規(guī)格:96T/48T
正癸酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) Decanoic acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 鈣離子膜通道內(nèi)質(zhì)網(wǎng)利羅丁受體(ryanodinereceptor;RyR)功能熒光檢測(cè)試劑盒20
氯離子熒光探針(MQAE)細(xì)胞CSF1R激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
組織CSK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞CSK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
組織C-MET激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞C-MET激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)