詳細介紹
DNA提取流程圖:
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
DNA Ladder (100~1500bp) | 500μl | GOY-F10140 |
產(chǎn)品詳細介紹:
儲存條件:冷凍(-20℃) 概述 The SDM21 ReallBand 100 bp DNA Ladder is composed of 11 individual DNA fragments:1.5k,1k,900,800,700,600,500,400,300,200,and 100 base pairs.This product contains two enhanced bands(1.5k and 500 bp)for easy reference. 使用說明 5μlper well for 100 gel applications |
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 5α-Androstane-3β,17β-diol 中文名:5α-雄烷二 分子式:C19H32O2 度:98.0%
兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISAKit Adipic dihydrazide 中文名:己二酸二 分子式:C6H14N4O2
兔誘導(dǎo)型NO合酶elisa試劑盒 兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒、兔誘導(dǎo)型NO合酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 6-Aminoindole 中文名:6-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 度:98.0%
兔抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒 5α-Androstane-3β,17β-diol 中文名:5α-雄烷二 分子式:C19H32O2
兔抑瘤素M(OSM)ELISAKit 5α-Androstane-3β,17β-diol 571-20-0 中文名:5α-雄烷二 分子式:C19H32O2 度:98.0%
化鉀(光譜SP) Potassium bromide 質(zhì)量規(guī)格:光譜SP ELISAKitLAM人脂阿拉伯甘露聚糖規(guī)格:48T/96T
偶氮胂Ⅰ水合物(90%) Arsenazo I Hydrate 質(zhì)量規(guī)格:0.9 小鼠細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒 ,英文名: LFA-3/CD58 ELISA Kit
無水硫酸鈉(SP) sulfate anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:SP 大鼠雌激素(E)ELISA檢測試劑盒Ratesogen,EELISAKit 96T/48T
二甲基砜(核磁共振定量標準品) Dimethyl sulfone 質(zhì)量規(guī)格:核磁共振定量標準品 人低氧誘導(dǎo)因子2(HIF-2)試劑盒 Human HIF-2 ELISA kit
1,3-(標準品) 1,3-Propanediol 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 Ratniicoxidesyhase,NOSELISAKit大鼠合成酶(NOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸(標準品) DHA 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 ERK蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25
二甲硝咪唑(標準品) Dimetridazole 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 MouseResistinELISA試劑盒小鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
青V鉀(標準品) Penicillin V potassium salt 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 小鼠細胞功能關(guān)聯(lián)抗原2(LFA2)ELISA試劑盒 ,英文名: LFA2 ELISA Kit
2-NP-AOZ(標準品) 2-NP-AOZ 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA檢測試劑盒HumancathepsinD,cath-DELISAKit 96T/48T
磺胺醋酰(標準品) Sulfacetamide 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 大鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒 Rat platelet factor 3,PF-3 ELISA kit
DNA Marker(100~1500bp)細胞EPHB2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織EPHA3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞EPHA3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織EPHA1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞EPHA1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))