詳細(xì)介紹
小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse Complement fragment 5a,C5a ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。
BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑40ml國(guó)產(chǎn)
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
純白鏈霉菌粉白變種 Streptomyces candidus var. alboroseus
HO-8910(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
阿布拉鏈霉菌除瘟變種 Streptomyces aburaviensis var. ablastmyceticus
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞英文名稱:DCS
小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
溝腸桿菌 Enterobacter cloacae
6T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
假絲酵母 Candida sp.
新生兒表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
GBC-SD, 人膽囊細(xì)胞 Human
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
宋氏志賀氏菌 Shigella sonnei
香菇 Lentinula edodes
唐菖蒲青霉 Penicillium gladioli
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
異常漢遜酵母 Hansenula anomala
HA(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
紫色鏈霉菌 Streptomyces violaceus
黑曲霉 Aspergillus niger
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
香菇 Lentinula edodes
AGS人胃腺細(xì)胞Butein (5 mg)2’,3,4,4’-tetrahydroxy Chalcone; (2E)-1-(2,4-dihydroxyphenyl)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-propen-1-one
Ticagrelor (5 mg)AR-C 126532XX|AZD 6140|Brilinta|Brilique
Naltrexone (hydrochloride) (100 mg)Antaxone|Depade|Trexan; 17-(cyclopropylmethyl)-4,5α-epoxy-3,14-dihydroxy-morphinan-6-one, monohydrochloride
UDP-Glucose (sodium salt) (100 mg)UDPG|Uridine-5’-diphosphoglucose; P’-α-D-glucopyranosyl ester, uridine 5’-(trihydrogen diphosphate), disodium salt
CFTR Inhibitor II (1 mg)Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Inhibitor II|GlyH-101; 2-[(3,5-dibromo-2,4-dihydroxyphenyl)methylene]hydrazide N-2-naphthalenyl-glycine
CID-755673 (25 mg)2,3,4,5-tetrahydro-7-hydroxy-1H-benzofuro[2,3-c]azepin-1-one
PKG Inhibitor (1 mg)Arginyl-lysyl-arginyl-alanyl-arginyl-lysyl-glutamic acid|Protein Kinase G Inhibitor; L-arginyl-L-lysyl-L-arginyl-L-alanyl-L-arginyl-L-lysyl-L-glutamic acid
Raltegravir (potassium salt) (50 mg)MK 0518; N-[(4-fluorophenyl)methyl]-1,6-dihydro-5-hydroxy-1-methyl-2-[1-methyl-1-[[(5-methyl-1,3,4-oxadiazol-2-4-pyrimidinecarboxamide, monopotassium salt
Chlorpromazine (hydrochloride) (1 g)CPZ|Largactil|Promacid|Thorazine; 2-chloro-N,N-dimethyl-10H-phenothiazine-10-propanamine, monohydrochloride
Citrulline-specific Probe (250 ug)Rh-PG|Rhodamine Phenylglyoxal; 3’,6’-bis(dimethylamino)-3-oxo-N-((1-(1-oxo-1-((3-(2-oxoacetyl)phenyl)amino)propan-2-yl)-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)-3H-spiro[isobenzofuran-1,9’-xanthene]-5-carboxamide hydrate
Foretinib (25 mg)EXEL 2880|GSK 1363089G|XL 880; N-
小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 XL888 (5 mg)N1-[(3-endo)-8-[5-(cyclopropylcarbonyl)-2-pyridinyl]-8-azabicyclo[3.2.1]oct-3-yl]-2-methyl-5-[[(1R)-1-methylpropyl]amino]-1,4-Benzenedicarboxamide
Carprofen (500 mg)Carprodyl|NSC 297935; 6-chloro-α-methyl-9H-carbazole-2-acetic acid
ErythromycinAk-Mycin|Eryc|NSC 55929|Staticin; erythromycin
Wnt-C59 (1 mg)PORCN Inhibitor II; 4