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          小鼠甲狀腺素(T4)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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          • 品牌 R&D/美國(guó)
          • 廠(chǎng)商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-03-15 14:26:36瀏覽次數(shù):206

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本小鼠甲狀腺素(T4)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法含量。

          詳細(xì)介紹

          小鼠甲狀腺素(T4)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱(chēng):Mouse thyroxine,T4 ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
          英文名稱(chēng):Mouse thyroxine,T4 ELISA Kit 
          規(guī)格:96T/48T
          主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
          性狀:盒裝液體
          人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
          標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
          種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
          小鼠甲狀腺素(T4)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
          1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
          2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
          3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
          小鼠甲狀腺素(T4)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
          1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
          3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
          4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
          5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱(chēng)取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
          7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
          8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
          小鼠甲狀腺素(T4)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
          1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
          2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
          3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
          4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
          5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
          6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿(mǎn)每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
          7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,再加入顯色劑 B  50ul。
          8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。 
          注意事項(xiàng):
          1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
          2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
          3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
          4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀(guān)察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
          5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)?jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
          6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),可和所購(gòu)經(jīng)銷(xiāo)商, 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
          小鼠甲狀腺素(T4)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
          1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
          2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
          3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          CNE(人鼻咽細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          黑綠木霉

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

          泡盛曲霉 Aspergillus awamori

          短梗青霉 Penicillium brevistipitatum

          金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae

          凍膠假絲酵母 Candida gelida

          中國(guó)倉(cāng)鼠肺成纖維樣細(xì)胞英文名稱(chēng):CHL-Don

          綠色木霉=木素木霉

          U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2

          根瘤菌 Rhizobium sp.

          費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

          小鼠腸微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

          EJ(人膀胱細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          人前列腺平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

          MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞gersion

          黑曲霉 Aspergillus niger

          EAC(小鼠艾氏腹水細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          大鼠神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

          毛柄金錢(qián)菌(金針菇) Flammulina velutipes 5(S)-HETE (25 ug)5S-hydroxy-6E,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; 5(S)-HETE

          9-OxoODE (25 ug)9-oxo-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9-KODE; 9-OxoODE

          96-Well Clear Bottom Black Culture Solid Plate (1 ea)96-Well Clear Bottom Black Culture Solid Plate

          8-Isoprostane EIA Antiserum (500 dtn)8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α; 8-Isoprostane EIA Antiserum

          Cyclic GMP AChE Tracer (500 dtn)cGMP AChE Tracer; Cyclic GMP AChE Tracer

          PPARγ FP Assay Fluorescent Probe - Green (1 ea)PPARγ FP Assay Fluorescent Probe - Green

          EP4 Receptor (rat) STEP Strip Plate (1 ea)EP4 Receptor (rat) STEP Strip Plate

          Hexadecyl Methyl Glycerol (10 mg)1-O-hexadecyl-2-O-methyl-sn-glycerol; 1-O-hexadecyl-2-O-methyl-sn-Glycerol; Hexadecyl Methyl Glycerol

          Thioetheramide-PC (5 mg)1,2-dideoxy-1-(S-hexadecyl)thio-2-(N-hexadecanoyl)amino-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; 1-Palmitylthio-2-palmitoylamido-1,2-dideoxy-sn-glycero-3-phosphorylcholine; Thioetheramide-PC

          SMase Sphingomyelin Substrate (1 ea)SMase Sphingomyelin Substrate

          Glycogen Standard (1 ea)Glycogen Standard

          Indomethacin N-octyl amide (50 mg)N-octyl-1-(4-chlorobenzoyl)-5-methoxy-1H-indole-3-acetamide; Indomethacin N-octyl amide

          Caffeic Acid (5 g)3,4-dihydroxy cinnamic acid; Caffeic Acid

          小鼠甲狀腺素(T4)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法Lactacystin (100 ug)3S-hydroxy-2R-(1-hydroxy-2-methylpropyl)-4R-methyl-5-oxo-2-pyrrolidinecarboxylate-N-acetyl-L-cysteine; Lactacystin

          15-Lipoxygenase Standard (1 ea)15-Lipoxygenase Standard

          3-bromo-7-Nitroindazole (250 mg)3-bromo-7-nitro-1H-indazole; 3-bromo-7-Nitroindazole

          DAF-2 (1 mg)2-(3,6-dihydroxy-4,5-diamino-9H-xanthen-9-yl)-benzoic acid; 4,5-Diaminofluorescein; DAF-2

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