詳細(xì)介紹
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse Cytochrome-C,Cyt-C ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Mouse Cytochrome-C,Cyt-C ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
白孢鏈霉菌逝霉素變種 Streptomyces albosporeus var. labilomyceticus
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人卵巢紫杉醇耐藥株英文名稱:A2780/Taxol
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
22RV1(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
6-10B, 人鼻咽細(xì)胞系
小鼠黑色素瘤細(xì)胞英文名稱:b16
桿菌屬 Lactobacillus sp.
橢孢青霉 Penicillium ellipsoideosporum
小鼠腎小管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞
爪哇根霉 Rhizopus javanicus
U251(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
OK(負(fù)鼠腎小管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.
香菇 Lentinula edodes
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞gersion
彩絨革蓋菌
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
SP Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)/兔&鼠通用型Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國產(chǎn)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
膠韌革菌
SK-BR-3(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 ErythromycinAk-Mycin|Eryc|NSC 55929|Staticin; erythromycin
Wnt-C59 (10 mg)PORCN Inhibitor II; 4
R-59-022 (1 mg)Diacylglycerol Kinase Inhibitor I; 6-[2-[4-[(4-fluorophenyl)phenylmethylene]-1-piperidinyl]ethyl]-7-methyl-5H-thiazolo[3,2-a]pyrimidin-5-one
DoripenemDoribax|Finibax|S 4661; 3-[[(3S,5S)-5S-[[(aminosulfonyl)amino]methyl]-3-pyrrolidinyl]thio]-6S-[(1R)-1-hydroxyethyl]-4R-methyl-7-oxo-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-ene-2-carboxylic acid
AB-FUBINACA isomer 1 (1 mg)N-(1-ami-oxopentan-2-yl)-1-(4-fluorobenzyl)-1H-indazole-3-carboxamide
PTI-2 (hydrochloride) (1 mg)N-Pentyl-3-thiazole-indole analog 2; N-(2-methoxyethyl)-N-(1-methylethyl)-2-(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-4-thiazolemethanamine, monohydrochloride
AKB48 CRM (2 ml)APINACA; 1-pentyl-N-tricyclo[3.3.1.13,7]dec-1-yl-1H-indazole-3-carboxamide
生物素標(biāo)記單甲基化組蛋白H3K9多肽Biotinylated Monomethyl Histone H3K9 Peptide (100 ul)
組蛋白H3多肽(氨基:1-21)Histone H3 Peptide (residues 1-21) (200 ul)
抗生素S 7481F1, CyclosporineCyclosporine A
4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride hydrochlorideAEBSF.HCl
1-tert-Butyl-3-(4-chlorophenyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-aminePP2
FISKERERAILSTKPPGTFLLRFSESSKStat3 Activation Inhibitor, SPI
(S,R)-3-(4-Hydroxyphenyl)-4,5-dihydro-5-isoxazole acetic acid, methyl esterMIF-Antagonist, ISO-1
(2-Methyl-4-(((4-methyl-2-(4-trifluoromethylphenyl)-1,3-thiazol-5-yl)methyl)sulfanyl)phenoxy)acetic acidGW501516
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法Biotinyl-Ala-Ser-Thr-DL-Asp-Fluoromethylketone; Biotinyl-ASTD-FluoromethylketoneBiotinyl-ASTD-FMK
4-[(E)-2-(3,5-Dimethoxyphenyl)ethenyl]phenol; 3’,5’-Dimethoxy-4-stilbenolPterostilbene
H-Ile-Pro-Ile-OHDiprotin A