詳細介紹
小鼠促黃體激素(LH)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Mouse luteotropic hormone,LH ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Mouse luteotropic hormone,LH ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠促黃體激素(LH)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠促黃體激素(LH)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠促黃體激素(LH)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠促黃體激素(LH)elisa試劑盒實驗方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
土曲霉 Aspergillus terreus
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
巴斯德畢赤酵母 Pichia pastoris
豬霍亂沙門氏菌孔成道夫變種 Salmonella cholerae-suis var. kunzendorf
小鼠肺大動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
PA319(人大腸細胞)5×106cells/瓶×2
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
根瘤菌
人神經(jīng)小膠質(zhì)細胞*培養(yǎng)基100mL
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠畸胎瘤細胞英文名稱:Pcc4
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
Swiss albion小鼠胚胎成纖維細胞英文名稱:3T6
靈芝 Ganoderma lucidium
小鼠淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
KB(人口腔表皮樣細胞)5×106cells/瓶×2
溝腸桿菌 Enterobacter cloacae
細胞名稱 種屬
IM-9(人外周血B淋巴細胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌 Lactococcus lactis
粗柄羊肚菌 Morchella crassipas
JEC, 人子宮內(nèi)膜腺細胞系
小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)
紫孢側(cè)耳(美味側(cè)耳) Pleurotus sapidus N-DBZ
N,N’-(Methylenedi-4,1-phenylene)bis-acetamide, N,N’-(Methylenedi-4,1-phenylene)diacetamide, NSC 12407FH1 (BRD-K4477)
Glucose AGE-BSA-IIGlucose AGE-BSA-II
Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Fatty Acid Low, pH – 7.0Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Fatty Acid Low, pH – 7.0
Bafilomycin A1 (500 ug)-(1-methylethyl)-2H-pyran-2-yl]butyl]-3,15-dimethoxy-5,7,9,11-tetramethyl-oxacyclohexadeca-3,5,11,13-tetraen-2-one; NSC 381866; Bafilomycin A1
Ac-Pro-Ala-Leu-rhodamine 110Ac-Pro-Ala-Leu-rhodamine 110
Calyculin ACalyculin A
D-myo-Inositol-3,4,5-triphosphate -sodium salt) (5 mg)Ins(3,4,5)-P3|3,4,5-IP4, D-myo-Inositol-3,4,5-triphosphate -sodium salt), D-myo-inositol-3,4,5-tris(hydrogen phosphate), trisodium salt
Bupropion -hydrochloride) (1 g)NSC 315851, Bupropion -hydrochloride), 1-(3-chlorophenyl)-2-[(1,1-dimethylethyl)amino]-1-propane, monohydrochloride
11-deoxy Prostaglandin E2 (100 mg)11-deoxy PGE2, 11-deoxy Prostaglandin E2, 9-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
Latanoprost Lactol (100 mg)Latanoprost Lactol, (3aR,4R,5R,6aS)-hexahydro-4-[(3R-3-hydroxy-5-phenylpentyl]-2H-cyclopenta[b]furan-2,5-diol
TQ3 CPG 1000Tide Quencher 3 CPG [TQ3 CPG] 1000
二水鈣(100GM)Calcium Chloride, Dihydrate, CAS# 10035-04-8; MW 147.01; ≥99%
七水硫鎂(5KG)Magnesium Sulfate, 7H2O, CAS# 10034-99-8; ≥98%
維生素B1(鹽噻胺)(25GM)Thiamine HCl, CAS# 67-03-8; ≥99%
熒光素 熒光參照標準Fluorescein Fluorescence reference standard
7-甲氧基香豆素-3-羧,琥珀酰亞胺酯7-Methoxycoumarin-3-carboxylic acid, succinimidyl ester
SMCC [(N-馬來酰亞胺甲基)環(huán)己烷-1-羧琥珀酰亞胺酯]SMCC [4-(N-Maleimidomethyl)cyclohexanecarboxylic acid N-hydroxysuccinimide ester]
小鼠促黃體激素(LH)elisa試劑盒實驗方法二氫乙錠Hydroethidine [Dihydroethidium]
鈣離子熒光探針腔腸素 cp 超級純Coelenterazine f UltraPure grade
Tide Quencher 4 胺 [TQ4 胺]Tide Quencher 4 amine [TQ4 amine]
DiSC2(7) [3,3-Diethylthiatricarbocyanine iodide]DiSC2(7) [3,3-Diethylthiatricarbocyanine iodide]