小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱：Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

大鼠表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

蘇云金芽胞桿菌亞毒亞種 Bacillus thuringiensis subsp. subtoxicus

米根霉 Rhizopus oryzae

大鼠腸巨噬細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國產(chǎn)

人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

NCTC 1469(小鼠正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

桿菌屬 Lactobacillus sp.

人小氣道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

少孢根霉

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

泡盛曲霉 Aspergillus awamori

泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.

金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae

檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

中分子量單一蛋白Marker（35 kD）50次國產(chǎn)

白黃鏈霉菌 Streptomyces alboflavus

TE-10(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

CW-2(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

WTRL1(大鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

梭形芽孢桿菌 Bacillus fusiformis

5637(人膀胱細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

黑曲霉 Aspergillus niger

人椎間盤髓核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

節(jié)桿菌 Arthrobacter sp. Eicosapentaenoic Acid methyl ester （100 mg）5Z，8Z，11Z，14Z，17Z-eicosapentaenoic acid， methyl ester； EPA methyl ester； Eicosapentaenoic Acid methyl ester

Linoleoyl Ethanolamide-d4 （100 ug）N-（2-hydroxyethyl-1，1，2，2-d4）-9Z，12Z-octadecadienamide； Linoleoyl Ethanolamide-d4

Tafluprost ethyl amide （5 mg）N-ethyl-9α，11α-dihydroxy-15，15-difluoro-16-phenoxy-17，18，19，20-tetranor-prosta-5Z，13E-dien-1-amide； Tafluprost ethyl amide

JWH 073 2’-naphthyl-N-（2-methylpropyl） isomer （10 mg）（1-isobutyl-1H-indol-3-yl）（naphthalen-2-yl）methanone； JWH 073 2’-naphthyl-N-（2-methylpropyl） isomer

JWH 081 6-methoxynaphthyl isomer （1 mg）（6-methoxy-1-naphthalenyl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）-methanone； JWH 166； JWH 081 6-methoxynaphthyl isomer

JWH 072 （25 mg）1-naphthalenyl（1-propyl-1H-indol-3-yl）-methanone； JWH 072

Linoleic Acid （peroxide free） （250 mg）9Z，12Z-octadecadienoic acid； fairic Acid； Linoleic Acid （peroxide free）

9（E），11（E）-Conjugated Linoleic Acid （10 mg）9E，11E-octadecadienoic acid； 9E，11E-CLA|Isolinoleic Acid|Mangold’s acid； 9（E），11（E）-Conjugated Linoleic Acid

Ro 67-4853 （1 mg）N-（9H-xanthen-9-ylcarbonyl）-butyl ester-carbamic acid； Ro 67-4853

bpV（phen） （potassium hydrate） （25 mg）（PB-7-23-111’1’3）-oxodiperoxy（1，10-phenanthroline-k/V1，k/V10）-vanadate（1-）， potassium trihydrate； Potassium Bisperoxo（1，10-phenanthroline） oxovanadate （V）|Bisperoxovanadium（phen）； bpV（phen） （potassium hydrate）

1-（3-Chlorophenyl） piperazine （hydrochloride） （50 mg）1-（3-chlorophenyl）-piperazine， monohydrochloride； mCPP|meta-Chlorophenyl piperazine； 1-（3-Chlorophenyl） piperazine （hydrochloride）

小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法JWH 073 6-methoxyindole analog （5 mg）（1-butyl-6-methoxy-1H-indol-3-yl）（naphthalen-1-yl）methanone； JWH 073 6-methoxyindole analog

Idarubicin （hydrochloride） （10 mg）（7S，9S）-9-acetyl-7-[（3-amino-2，3，6-trideoxy-α-L-lyxo-hexopyranosyl）oxy]-7，8，9，10-tetrahydro-6，9，11-trihydroxy-5，12-naphthacenedione， monohydrochloride； 4-Demethoxydaunorubicin|4-DMD|NSC 256439； Idarubicin （hydrochloride）