詳細介紹
小鼠補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Mouse Complement 3,C3 ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題,收貨后十五個工作日內包退換。
英文名稱:Mouse Complement 3,C3 ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。
小鼠補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
杜鵑盤多毛孢霉 Pestalotia rhododendri
Hs 746T(人胃細胞)5×106cells/瓶×2
葡萄球菌屬 Staphylococcus sp.
黑根霉=匍枝根霉
HEC-1A, 人子宮內膜細胞系 Human
細胞名稱 種屬
大麗輪枝孢 Verticillium dahliae
NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion
人腹膜毛細血管內皮細胞*培養(yǎng)基100mL
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
大鼠淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
異酒香酵母 Brettanomyces anomalus
灰色困難鏈霉菌 Streptomyces griseodifficilis
小腸結腸炎耶爾森氏菌 Yersinia enterocolitica
三寶壟根霉 Rhizopus semaranzensis
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa
PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株(高分化) Rattus
炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus 20-carboxy Leukotriene B4 (25 ug)5S,12R-dihydroxy-6Z,8E,10E,14Z-eicosatetraene-1,20-dioic acid; 20-carboxy LTB4; 20-carboxy Leukotriene B4
12(S)-HEPE (25 ug)12S-hydroxy-5Z,8Z,10E,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; 12(S)-HEPE
5(S)-HETrE (50 ug)5S-hydroxy-6E,8Z,11Z-eicosatrienoic acid; 5(S)-HETrE
Potassium Hydroxide (1 ea)Potassium Hydroxide
Prostaglandin D2 Express AChE Tracer (500 dtn)Prostaglandin D2 Express AChE Tracer
13(S)-HpOTrE (500 ug)13S-hydroperoxy-9Z,11E,15Z-octadecatrienoic acid; 13(S)-HpOTrE
Maturation-Inducing Steroid (salmonid) AChE Tracer (500 dtn)MIS (salmonid) AChE Tracer|17。alpha。,20。beta。-dihydroxy-4-Pregnen-3-one AChE Tracer; Maturation-Inducing Steroid (salmonid) AChE Tracer
Tris-EDTA Stock Solution (10X, pH 7。4) (500 mL)TE Buffer; Tris-EDTA Stock Solution (10X, pH 7。4)
Methylcarbamyl PAF C-16 (5 mg)1-O-hexadecyl-2-O-(N-methylcarbamoyl)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Methylcarbamyl PAF C-16
C-8 Ceramide-1-phosphate (25 mg)N-octanoylsphingosine-1-phosphate; C-8 Ceramide-1-phosphate
COX-FA Fluorometric Substrate (1 ea)Fluorometric Substrate; COX-FA Fluorometric Substrate
Latanoprost Lactone Diol (50 mg)(3aR,4R,5R,6aS)-hexahydro-5-hydroxy-4-[(3R)-3-hydroxy-5-phenylpentyl]-2H-cyclopenta[b]furan-2-one; Latanoprost Lactone Diol
小鼠補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法CAY10404 (1 mg)3-[4-(methylsulfonyl)phenyl]-4-phenyl-5-(trifluoromethyl)-isoxazole; CAY10404
Furegrelate (sodium salt) (5 mg)5-(3-pyridinylmethyl)-2-benzofurancarboxylic acid, sodium salt; U-63557A; Furegrelate (sodium salt)
BAY-u9773 (100 ug)4-[[(1R,2E,4E,6Z,9Z)-1-[(1S)-4-carboxy-1-hydroxybutyl]-2,4,6,9-pentadecatetraenyl]thio]-benzoic acid; BAY-u9773