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          小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa試劑盒操作步驟

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          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-03-15 13:23:18瀏覽次數(shù):149

          聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa試劑盒操作步驟含量。

          詳細(xì)介紹

          小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Mouse β mannosidase,β Manase ELISA Kit       檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
          英文名稱:Mouse β mannosidase,β Manase ELISA Kit   
          規(guī)格:96T/48T
          主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
          性狀:盒裝液體
          人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
          標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
          種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
          小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
          1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
          2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
          3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
          小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
          1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
          3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
          4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
          5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
          7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
          8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
          小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
          1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
          2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個(gè)濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
          3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
          4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
          5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
          6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
          7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,再加入顯色劑 B  50ul。
          8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
          注意事項(xiàng):
          1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
          2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
          3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
          4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
          5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
          6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
          小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa試劑盒操作步驟安全性
          1. 避免人體直接接觸顯色劑AB和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
          2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
          3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

          大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

          泡盛曲霉 Aspergillus awamori

          桿菌屬 Lactobacillus sp.

          金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae

          嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus

          中分子量單一蛋白Marker(90 kD)50次國產(chǎn)

          高羊肚菌 Morchella elata

          TM4(正常小鼠睪Sertoli細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          小鼠腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          維涅蘭德固氮菌 Azotobacter vinelandii

          EA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:Dami

          粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

          費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

          人結(jié)腸細(xì)胞英文名稱:HCT 116

          鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

          凝結(jié)芽孢桿菌 Bacillus coagulans

          人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

          沙地青霉 Penicillium arenicola

          葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

          U14(小鼠子宮頸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          Hce-8693(人盲腸腺細(xì)胞(未分化) ML-030 (10 mg)3-(2,5-dimethoxyphenyl)-6-(3,4-dimethoxyphenyl)-7H-1,2,4-triazolo[3,4-b][1,3,4]thiadiazine; CID-11757146; ML-030

          FCCP (10 mg)2-[2-[4-(trifluoromethoxy)phenyl]hydrazinylidene]-propanedinitrile; Trifluoromethoxy carbonylcyanide phenylhydrazone; FCCP

          BRM bromodomain Ligand/APC Acceptor Mixture (2100 wells)BRM bromodomain Ligand/APC Acceptor Mixture

          MN-25-2-methyl derivative (10 mg)7-methoxy-2-methyl-1-[2-(4-morpholinyl)ethyl]-N-[(1S,2S,4R)-1,3,3-trimethylbicyclo[2。2。1]hept-2-yl]-1H-indole-3-carboxamide; MN-25-2-methyl derivative

          15-epi Prostaglandin A1 (100 ug)15-epi PGA1; 9-oxo-15R-hydroxy-prosta-10,13E-dien-1-oic acid

          8-Bromoisoquinoline (5 g)8-bromo-isoquinoline

          TPPU (25 mg)N-[1-(1-oxopropyl)-4-piperidinyl]-N’-[4-(trifluoromethoxy)phenyl)-urea

          (±)11-HEPE (50 ug)(±)-11-hydroxy-5Z,8Z,12E,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; (±)11-HEPE

          14(15)-EET (100 ug)(±)14(15)-epoxy-5Z,8Z,11Z-eicosatrienoic acid; 14(15)-EpETrE; 14(15)-EET

          MF63 (1 mg)2-

          Yangonin (1 mg)4-methoxy-6-[(1E)-2-(4-methoxyphenyl)ethenyl]-2H-pyran-2-one

          25N-NBOMe (hydrochloride) (1 mg)2;C-N-NBOMe; 2-(2,5-dimethoxy-4-nitrophenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethanamine, monohydrochloride

          Conduritol B epoxide (25 mg)CBE; 1,2-anhydro-myo-inositol

          5-fluoro SDB-005 (10 mg)naphthalen-1-yl 1-(5-fluoropentyl)-1H-indazole-3-carboxylate

          GSK 126 (1 mg)N-[(1,2-dihydro-4,6-dimethyl-2-oxo-3-pyridinyl)methyl]-3-methyl-1-[(1S)-1-methylpropyl]-6-[6-(1-piperazinyl)-3-pyridinyl]-1H-indole-4-carboxamide

          Zidovudine (100 mg)AZT|Azidothymidine|NSC 602670|Retrovir|ZDV; 3’-

          小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa試劑盒操作步驟Ganglioside GM1 Asialo (500 ug)ASGM1|Asialo GM1|Gangliotetraosylceramide; Ganglioside GM1 Asialo

          Mescaline (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)NSC 30419|TMPEA; 3,4,5-trimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride5×106cells/瓶×2

          屎腸球菌 Enterococcus faecium

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