詳細(xì)介紹
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Mouse Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Mouse Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
根瘤菌 Rhizobium sp.
膠韌革菌 Gloeostereum incarnatum
人支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
珊瑚色諾卡氏菌 Nocardia coralline
果香地霉
TE-11(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
A-427(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
異常漢遜酵母 Hansenula anomala
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱:3T3A31
Caki-2(人腎透細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
爪哇正青霉 Eupenicillium javanicum
灰色產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces griseochromogenes
NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
狀絲孢酵母 Trichosporon capitatum
出芽短梗霉=出芽茁霉 Aureobasidium pullulans
MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 Mouse
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
尖孢鐮刀菌棉花?;?Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
Caov-3(人突狀卵巢腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
鏈球菌 Lactococcus lactis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
紅曲霉 Monascus anka
猴菌
樹狀假絲酵母 Candida cerevisiae
香菇 Lentinula edodes
木霉Carboxytetramethylrhodamine, succinimidyl ester] Validated for labeling oligos
臺盼紫 0。1M水溶液Trypan Purple 0。1 M aqueous solution
酪蛋白,TAMRA標(biāo)記Casein, TAMRA-conjugated
鈣離子熒光探針Rhod-5N,三鉀鹽Rhod-5N, tripotassium salt
6-HEX氨基磷酯[5’-六氯熒光素氨基磷酯]6-HEX phosphoramidite [5’-Hexachlorofluorescein phosphoramidite]
iFluor 647-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/mliFluor 647-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Cyanine 3疊氮化物 [相當(dāng)于Cy3疊氮化物]Cyanine 3 azide [equivalent to Cy3 azide]
ICG-Sulfo-EG8-OSuICG-Sulfo-EG8-OSu
2C-N (5 mg)2,5-dimethoxy-4-nitro-benzeneethanamine; 2,5-Dimethoxy-4-nitrophenethylamine; 2C-N
BI6015 (5 mg)2-methyl-1-[(2-methyl-5-nitrophenyl)sulfonyl]-1H-benzimidazole; BI6015
Prostaglandin D3 (1 mg)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-oxo-prosta-5Z,13E,17Z-trien-1-oic acid; PGD3; Prostaglandin D3
N-3-oxo-tetradecanoyl-L-Homoserine lactone (25 mg)3-oxo-N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-tetradec*; 3-oxo-C14-HSL|N-3-oxo-myristoyl-L-Homoserine lactone; N-3-oxo-tetradecanoyl-L-Homoserine lactone
AGK2 (1 mg)2-cyano-3-[5-(2,5-dichlorophenyl)-2-furanyl]-N-5-quinolinyl-2-propenamide; AGK2
Pimelic Diphenylamide 106 (5 mg)N1-(2-aminophenyl)-N7-(4-methylphenyl)-heptanediamide; TC-H 106|Histone Deacetylase Inhibitor VII; Pimelic Diphenylamide 106
Cannabidiol dimethyl ether (5 mg)1,3-dimethoxy-2-[(1R,6R)-3-methyl-6-(1-methylethenyl)-2-cyclohexen-1-yl]-5-pentyl-benzene; Cannabidiol-2’,6’-dimethyl ether|CBDD; Cannabidiol dimethyl ether
SU 6656 (10 mg)2,3-dihydro-N,N-dimethyl-2-oxo-3-[(4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-2-yl)methylene]-1H-indole-5-sulfonamide; SU 6656
Oxalomalic Acid (sodium salt) (25 mg)3-carboxy-3-deoxy-2-pentulosaric acid, trisodium salt; Oxalomalic Acid (sodium salt)
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟13,14-dihydro-15(R)-Prostaglandin E1 (1 mg)9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-prostan-1-oic acid; 13,14-dihydro-15(R)-PGE1; 13,14-dihydro-15(R)-Prostaglandin E1
CAY10408 (10 mg)9-oxo-11。alpha。,16R-dihydroxy-17-cyclobutyl-5Z,13E-dien-1-oic acid; CAY10408
JWH 149 (10 mg)(4-methyl-1-naphthalenyl)(2-methyl-1-pentyl-1H-indol-3-yl)-methanone; JWH 149