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          小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟

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          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-03-15 13:16:27瀏覽次數(shù):122

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟含量。

          詳細(xì)介紹

          小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Mouse neutrophil elastase,NE ELISA Kit      檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
          英文名稱:Mouse neutrophil elastase,NE ELISA Kit      檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)
          規(guī)格:96T/48T
          主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
          性狀:盒裝液體
          人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
          標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
          種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
          小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
          1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
          2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
          3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
          小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
          1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
          3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
          4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
          5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
          7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
          8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
          小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
          1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
          2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個(gè)濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
          3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
          4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
          5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
          6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
          7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,再加入顯色劑 B  50ul。
          8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
          注意事項(xiàng):
          1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
          2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
          3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
          4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
          5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
          6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
          小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟安全性
          1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
          2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
          3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

          小鼠成纖維細(xì)胞英文名稱:L929

          運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌 Zymomonas mobilis

          HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          蘇云金芽胞桿菌莫里遜亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Morrisoni

          粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

          肝細(xì)胞HBV病毒株英文名稱:HEPG2.2.15

          異常漢遜酵母 Hansenula anomala

          F9(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

          植物桿菌 Lactobacillus plantarum

          猴菌 Hericium erinaceus

          植物桿菌 Lactobacillus plantarum

          QBC-939, 人膽管細(xì)胞gersion

          松口蘑 Tricholoma matsutake

          檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

          豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

          玫瑰栗色鏈霉菌 Streptomyces rosecastaneus

          MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

          淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus

          小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 7(Z),10(Z),13(Z),16(Z),19(Z)-N-(2-hydroxyethyl)-Docosapentaenamide (5 mg)N-(2-hydroxyethyl)-7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosapentaenamide; 7(Z),10(Z),13(Z),16(Z),19(Z)-N-(2-hydroxyethyl)-Docosapentaenamide

          Fusidic Acid (sodium salt) (1 g)(4α,8α,9β,13α,14β)-16β-(acetyloxy)- 3α,11α-dihydroxy-29-nordammara-17Z(20),24-dien-21-oic acid, monosodium salt; SQ 16,36Fusidic Acid (sodium salt)

          AM2201 8-quinolinyl carboxamide (5 mg)1-(5-fluoropentyl)-N-(quinolin-8-yl)-1H-indole-3-carboxamide; AM2201 8-quinolinyl carboxamide

          PTIO (100 mg)4,5-dihydro-4,4,5,5-tetramethyl-2-phenyl-3-oxide-1H-imidazol-1-yloxy; α-Phenyltetramethylnitronyl nitroxide; PTIO

          Proscillaridin A (10 mg)(3β)-3-[(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)oxy]-14-hydroxy-bufa-4,20,22-trienolide; A-32686|NSC 7521|PSC-801; Proscillaridin A

          1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC (1 g)1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine; 1,2-DSPC|Coatsome MC 8080|1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine; 1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC

          ML-030 (25 mg)3-(2,5-dimethoxyphenyl)-6-(3,4-dimethoxyphenyl)-7H-1,2,4-triazolo[3,4-b][1,3,4]thiadiazine; CID-11757146; ML-030

          FCCP (50 mg)2-[2-[4-(trifluoromethoxy)phenyl]hydrazinylidene]-propanedinitrile; Trifluoromethoxy carbonylcyanide phenylhydrazone; FCCP

          BRM bromodomain Ligand/APC Acceptor Mixture (420 wells)BRM bromodomain Ligand/APC Acceptor Mixture

          MN-25-2-methyl derivative (5 mg)7-methoxy-2-methyl-1-[2-(4-morpholinyl)ethyl]-N-[(1S,2S,4R)-1,3,3-trimethylbicyclo[2。2。1]hept-2-yl]-1H-indole-3-carboxamide; MN-25-2-methyl derivative

          15-epi Prostaglandin A1 (500 ug)15-epi PGA1; 9-oxo-15R-hydroxy-prosta-10,13E-dien-1-oic acid

          小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟6-Bromoisoquinoline (5 g)NSC 229320; 6-bromo-isoquinoline

          HZ52 (25 mg)2-(4-(bipheny-4-ylamino)-6-chloropyrimidiny-2-ylthio)-octanoic acid

          (±)11-HEPE (100 ug)(±)-11-hydroxy-5Z,8Z,12E,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; (±)11-HEPE

          14(15)-EET (500 ug)(±)14(15)-epoxy-5Z,8Z,11Z-eicosatrienoic acid; 14(15)-EpETrE; 14(15)-EET

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