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          小鼠補體蛋白4(C4)elisa試劑盒操作步驟

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          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2017-03-15 13:03:05瀏覽次數(shù):152

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本小鼠補體蛋白4(C4)elisa試劑盒操作步驟含量。

          詳細介紹

          小鼠補體蛋白4(C4)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Mouse Complement 4,C4 ELISA Kit      檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。 
          英文名稱:Mouse Complement 4,C4 ELISA Kit  
          規(guī)格:96T/48T
          主要成分:酶標板,試劑,標準品等
          性狀:盒裝液體
          人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
          標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
          種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
          小鼠補體蛋白4(C4)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
          1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
          2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
          3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
          小鼠補體蛋白4(C4)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
          1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          2. 細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
          3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
          4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
          5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
          7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
          8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
          小鼠補體蛋白4(C4)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
          1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
          2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組(個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
          3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
          4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
          5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
          6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
          7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,再加入顯色劑 B  50ul
          8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
          注意事項:
          1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
          2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復(fù)性。
          3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
          4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
          5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
          6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
          小鼠補體蛋白4(C4)elisa試劑盒操作步驟安全性
          1. 避免人體直接接觸顯色劑AB和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
          2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
          3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          WM35, 人黑色素瘤細胞 Human

          人結(jié)腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL

          皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum

          KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞(腦轉(zhuǎn)移))5×106cells/瓶×2

          BC-009(人腺細胞)5×106cells/瓶×2

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          大鼠外周血白細胞*培養(yǎng)基100mL

          熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

          酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

          嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

          地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

          人子宮內(nèi)膜腺細胞英文名稱:HEC-1-A

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          野生鏈球菌 Streptococcus ferus

          苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

          苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

          人腦靜脈血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

          豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

          A9(小鼠皮下結(jié)締組織細胞)5×106cells/瓶×2

          大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          宮頸英文名稱:HelaS3

          大鼠直腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL

          大鼠腎足突細胞*培養(yǎng)基100mL

          新型鈣離子熒光探針Quest Fluo-8, AMQuest Fluo-8, AM

          5(6)-FAM氨基磷酯5(6)-FAM Phosphoramidite

          iFluor 700-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/mliFluor 700-streptavidin conjugate 1 mg/ml

          Cyanine 3胺 [相當于Cy3胺]Cyanine 3 amine [equivalent to Cy3 amine]

          ICG-Sulfo-EG4-OSuICG-Sulfo-EG4-OSu

          2C-T-2 (hydrochloride) (10 mg)4-(ethylthio)-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride; 2,5-Dimethoxy-4-ethylthiophenethylamine; 2C-T-2 (hydrochloride)

          Daminozide (10 g)1-(2,2-dimethylhydrazide)-butanedioic acid; Alar|Aminozide|B 995|DIMG|DMASA|Kylar|SADH|Succinic Acid; Daminozide

          Pterostilbene (250 mg)4-[(1E)-2-(3,5-dimethoxyphenyl)ethenyl)-phenol; 3’,5’-Dimethoxy-4-Stilbenol|trans-3,5-Dimethoxy-4’-Hydroxystilbene; Pterostilbene

          N-hexadecanoyl-L-Homoserine lactone (10 mg)N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-hexadec*; N-palmitoyl-L-Homoserine|C16-HSL; N-hexadecanoyl-L-Homoserine lactone

          AGK2 (25 mg)2-cyano-3-[5-(2,5-dichlorophenyl)-2-furanyl]-N-5-quinolinyl-2-propenamide; AGK2

          N-3-oxo-tetradec-7(Z)-enoyl-L-Homoserine lactone (10 mg)3-oxo-N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-7-tetradecenamide; 3-oxo-C14:1-Δ7cis-(L)-HSL; N-3-oxo-tetradec-7(Z)-enoyl-L-Homoserine lactone

          FK-866 (10 mg)N-[4-(1-benzoyl-4-piperidinyl)butyl]-3-(3-pyridinyl)-2E-propenamide; K 22。175; FK-866

          SU 6656 (5 mg)2,3-dihydro-N,N-dimethyl-2-oxo-3-[(4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-2-yl)methylene]-1H-indole-5-sulfonamide; SU 6656

          Apelin-13 (1 mg)L-glutaminyl-L-arginyl-L-prolyl-L-arginyl-L-leucyl-L-seryl-L-histidyl-L-lysylglycyl-L-prolyl-L-methionyl-L-prolyl-L-phenylalanine; Apelin-13

          13,14-dihydro-15(R)-Prostaglandin E1 (100 mg)9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-prostan-1-oic acid; 13,14-dihydro-15(R)-PGE1; 13,14-dihydro-15(R)-Prostaglandin E1

          CAY10408 (50 mg)9-oxo-11。alpha。,16R-dihydroxy-17-cyclobutyl-5Z,13E-dien-1-oic acid; CAY10408

          小鼠補體蛋白4(C4)elisa試劑盒操作步驟 JWH 167 (10 mg)1-(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-2-phenyl-ethanone; JWH 167

          15(S)-15-methyl Prostaglandin E2 (1 mg)9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-15-methyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(S)-15-methyl PGE2; 15(S)-15-methyl Prostaglandin E2Dami(人巨核細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2

          瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

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