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小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica
Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
純白鏈霉菌 Streptomyces candidus
ZR-75-1(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
強(qiáng)壯纖維單胞菌 Cellulomonas cartae
羽扇豆根瘤菌 Bradyrhizobium lupini
BEL-7405(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
佛羅里達(dá)側(cè)耳 Pleurotus florida
黃綠鏈霉菌 Streptomyces flavoviridis
NCI-H2170(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
人角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
293A,人胚腎上皮細(xì)胞系(腺病毒包裝級(jí)別) Human
白鏈霉菌 Streptomyces albolongus
大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 Human
厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
鏈霉菌 Streptomyces sp.
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 Mouse
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis SNAP (10 mg)N-(acetyloxy)-3-nitrosothiovaline; S-Nitroso-N-Acetyl-D,L-Penicillamine; SNAP
7(Z)-Tricosene (50 mg)7Z-tricosene; 7(Z)-Tricosene
Palmitoyl Ethanolamide-d5 (5 mg)N-(2-hydroxyethyl)-hexadec*-15,15,16,16,16-d5; Palmidrol-d5|PEA-15,15,16,16,16-d5; Palmitoyl Ethanolamide-d5
JWH 018 4-hydroxyindole metabolite (5 mg)(4-hydroxy-1-pentyl-1H-indol-3-yl)(naphthalen-1-yl)-methanone; JWH 018 4-hydroxyindole metabolite
JWH 251 3-methylphenyl isomer (25 mg)1-(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-2-(m-tolyl)ethanone; JWH 251 3-methyl isomer; JWH 251 3-methylphenyl isomer
2,3-Methylenedioxy Pyrovalerone (hydrochloride) (10 mg)1-(benzo[d][1,3]dioxol-4-yl)-2-(piperidin-1-yl)pentan-1-one, monohydrochloride; 2,3-MDPV; 2,3-Methylenedioxy Pyrovalerone (hydrochloride)
JWH 180 (25 mg)(1-propyl-1H-indol-3-yl)(4-propyl-1-naphthalenyl)-methanone; JWH 180
Linoelaidic Acid (250 mg)9E,12E-octadecadienoic acid; Linoelaidic Acid
13-Docosenamide (1 g)13Z-docosenamide; Armoslip E|Erucamide|cis-13-Docosenamide; 13-Docosenamide
JNJ-5207852 (50 mg)1-[3-[4-(1-piperidinylmethyl)phenoxy]propyl]-piperidine; JNJ-5207852
Ku-0063794 (50 mg)rel-5-[2-[(2R,6S)-2,6-dimethyl-4-morpholinyl]-4-(4-morpholinyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-2-methoxy-benzenemethanol; Ku-0063794
IWP-2-V2 (10 mg)N-(6-methyl-2-benzothiazolyl)-2-[[3,4,6,7-tetrahydro-4-oxo-3-(phenylmethyl)thieno[3,2-d]pyrimidin-2-yl]thio]-acetamide; Inhibitor of Wnt Production-2-V2; IWP-2-V2
小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法PB-22 (50 mg)1-pentyl-8-quinolinyl ester-1H-indole-3-carboxylic acid; QUPIC; PB-22
Amlexanox (50 mg)2-amino-7-(1-methylethyl)5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3-b]pyridine-3-carboxylic acid; Aphthasol
MDL 28170 (5 mg)N-[(1S)-1-[[(1-formyl-2-phenylethyl)amino]carbonyl]-2-methylpropyl]-carbamic acid, phenylmethyl ester; Calpain Inhibitor III; MDL 28170