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          小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)elisa試劑盒操作步驟

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          • 品牌 R&D/美國
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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-03-15 12:40:18瀏覽次數(shù):147

          聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)elisa試劑盒操作步驟含量。

          詳細(xì)介紹

          小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Mouse nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
          英文名稱:Mouse nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit   
          規(guī)格:96T/48T
          主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
          性狀:盒裝液體
          人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
          標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
          種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
          小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
          1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
          2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
          3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
          小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
          1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
          3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
          4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
          5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
          7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
          8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
          小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
          1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
          2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
          3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
          4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
          5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
          6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
          7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,再加入顯色劑 B  50ul。
          8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
          注意事項(xiàng):
          1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
          2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
          3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
          4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
          5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
          6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
          小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)elisa試劑盒操作步驟安全性
          1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
          2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
          3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

          植物桿菌 Lactobacillus plantarum

          微白色放線菌轉(zhuǎn)換變種 Actinomyces albidus

          暗黑微綠鏈霉菌 Streptomyces atrovirens

          膠韌革菌 Gloeostereum incarnatum

          巴氏醋桿菌羅旺亞種 Acetobacter pastuerianus subsp. lovani

          出芽短梗霉=出芽茁霉 Aureobasidium pullulans

          Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒規(guī)格:50次

          自養(yǎng)黃色桿菌 Xanthobacter autotrophicus

          暫無 Achromobacter xerosis

          小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          食管英文名稱:KYSE510

          HHCC(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          RBE, 人肝膽管細(xì)胞gersion

          嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

          Calu-6(人肺退行性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          MDA-MB-231(ATCC來源), 人腺細(xì)胞

          休哈塔假絲酵母 Candida shehatae

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          醬油曲霉

          爪哇根霉 Rhizopus javanicus

          香菇 Lentinula edodes JWH 180 (5 mg)(1-propyl-1H-indol-3-yl)(4-propyl-1-naphthalenyl)-methanone; JWH 180

          Linoelaidic Acid (5 g)9E,12E-octadecadienoic acid; Linoelaidic Acid

          13-Docosenamide (500 mg)13Z-docosenamide; Armoslip E|Erucamide|cis-13-Docosenamide; 13-Docosenamide

          Olopatadine (hydrochloride) (10 mg)11Z-[3-(dimethylamino)propylidene]-6,11-dihydro-dibenz[b,e]oxepin-2-acetic acid, monohydrochloride; ALO 4943A|Allerock|KW 4679|Olopine|Patanase; Olopatadine (hydrochloride)

          GDC 0449 (10 mg)2-chloro-N-[4-chloro-3-(2-pyridinyl)phenyl]-4-(methylsulfonyl)-benzamide; Vismodegib; GDC 0449

          IWP-2-V2 (25 mg)N-(6-methyl-2-benzothiazolyl)-2-[[3,4,6,7-tetrahydro-4-oxo-3-(phenylmethyl)thieno[3,2-d]pyrimidin-2-yl]thio]-acetamide; Inhibitor of Wnt Production-2-V2; IWP-2-V2

          BB-22 (10 mg)1-(cyclohexylmethyl)-8-quinolinyl ester-1H-indole-3-carboxylic acid; QUCHIC; BB-22

          α-PVT (hydrochloride) (10 mg)2-(pyrrolidin-1-yl)-1-(thiophen-2-yl)pentan-1-one, monohydrochloride; CDC|α-Pyrrolidinopentiothiophenone; α-PVT (hydrochloride)

          MDL 28170 (50 mg)N-[(1S)-1-[[(1-formyl-2-phenylethyl)amino]carbonyl]-2-methylpropyl]-carbamic acid, phenylmethyl ester; Calpain Inhibitor III; MDL 28170

          RCS-4 N-(4-hydroxypentyl) metabolite-d5 (500 ug)(1-(4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl-2,4,5,6,7-d5)-(4-methoxyphenyl)-methanone; RCS-4 N-(4-hydroxypentyl) metabolite-d5

          AM2201 N-(3-chloropentyl) isomer (1 mg)(1-(3-chloropentyl)-1H-indol-3-yl)(naphthalen-1-yl)methanone; AM2201 N-(3-chloropentyl) analog; AM2201 N-(3-chloropentyl) isomer

          小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)elisa試劑盒操作步驟BB-22 4-hydroxyquinoline isomer (5 mg)quinolin-4-yl 1-(cyclohexylmethyl)-1H-indole-3-carboxylate; BB-22 4-hydroxyquinoline isomer

          25T2-NBOMe (hydrochloride) (5 mg)2-(2,5-dimethoxy-4-(methylthio)phenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethan-1-amine hydrochloride; 2C-T-NBOMe; 25T2-NBOMe (hydrochloride)

          (S)-10-hydroxy-Camptothecin (25 mg)(4S)-4-ethyl-4,9-dihydroxy-1H-pyrano[3’,4’:6,7]indolizi,2-b]quinoline-3,14(4H,12H)-dione; ChEMBL 273862|NSC 107124; (S)-10-hydroxy-Camptothecin

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