詳細介紹
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Mouse Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題,收貨后十五個工作日內包退換。
英文名稱:Mouse Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
桿菌屬 Lactobacillus sp.
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人卵巢微血管內皮細胞*培養(yǎng)基100mL
PANC-1, 人胰腺細胞
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
TT(人甲狀腺導管細胞)5×106cells/瓶×2
PA-1(人卵巢腺細胞)5×106cells/瓶×2
球孢白僵菌 Beauveria bassiana
香菇 Lentinula edodes
藤黃微球菌 Micrococcus luteus
苜蓿中華根瘤菌
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
人膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
疣孢脆柄菇 Psathyrella velutina
B16(小鼠黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
紅白細胞白血病細胞英文名稱:HEL(懸?。?/span>
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
大鼠大隱靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
人結腸細胞英文名稱:COLO 205
脂鏈球菌 Streptococcus cremoris
KB/鼻咽細胞株國產
糙皮側耳 Pleurotus ostreatus ML-090 (25 mg)5,12-dihydro-quinoxalino[2,3-b]quinoxaline; CCG-44699|CID-616479|NSC 179821|Fluoflavin; ML-090
Dovitinib (5 mg)4-
CBP bromodomain Europium Chelate (420 wells)CBP bromodomain Europium Chelate
N-acetyl-3,4-Methylenedioxymethcathinone (50 mg)N-
ABT-888 (hydrochloride) (5 mg)Veliparib; 2-[(2R)-2-methyl-2-pyrrolidinyl]-1H-benzimidazole-7-carboxamide, dihydrochloride
GW 4064 (10 mg)3-[2-[2-chloro-4-[[3-(2,6-dichlorophenyl)-5-(1-methylethyl)-4-isoxazolyl]methoxy]phenyl]ethenyl]-benzoic acid
SR 1664 (25 mg)4’-[[2,3-dimethyl-5-[[[(1S)-1-(4-nitrophenyl)ethyl]amino]carbonyl]-1H-indol-1-yl]methyl]-[1,1’-biphenyl]-2-carboxylic acid
(±)15-HEPE (50 ug)(±)-15-hydroxy-5Z,8Z,11Z,13E,17Z-eicosapentaenoic acid; (±)15-HEPE
(±)5,6-DHET lactone (100 ug)(±)5,6-dihydroxy-8Z,11Z,14Z-eicosatrienoic acid, 1,5-lactone; (±)5,6-DiHETrE lactone; (±)5,6-DHET lactone
Platencin (100 ug)3-[[3-[(2S,8S)-1,3,4,7,8,8aR-hexahydro-8-methyl-3-methylene-7-oxo-2H-2,4aS-ethanon-aphthalen-8-yl]-1-oxopropyl]amino]-2,4-dihydroxy-benzoic acid
Thioridazine (hydrochloride) (10 g)Aldazine|Mellaril; 10-[2-(1-methyl-2-piperidinyl)ethyl]-2-(methylthio)-10H-phenothiazine, hydrochloride
Cathepsin G Inhibitor I (1 mg)P-
AM580 (10 mg)CD336|NSC 608001|Ro 40-6055; 4-
4-fluoro PV8 (hydrochloride) (1 mg)4-fluoro α-PHPP|para-fluoro-PV8; 1-(4-fluorophenyl)-2-(pyrrolidin-1-yl)heptan-1-one, monohydrochloride
Modafinil (5 mg)CEP 1538|Nuvigil|Provigil; 2-[(diphenylmethyl)sulfinyl]-acetamide
4-methoxy PV8 (hydrochloride) (5 mg)4-MeO-PV8|4-methoxy PHPP|p-MeO-PV8; 1-(4-methoxyphenyl)-2-(pyrrolidin-1-yl)heptan-1-one, monohydrochloride
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟ICI 118551 (hydrochloride) (25 mg)(2R,3R)-rel-1-[(2,3-dihydro-7-methyl-1H-inden-4-yl)oxy]-3-[(1-methylethyl)amino]-2-butanol, monohydrochloride
N-hydroxy MDA (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)MDOH|N-hydroxy-3,4-Methylenedioxyamphetamine; N-hydroxy-α-methyl-1,3-benzodioxole-5-ethanamine, monohydrochloride