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小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
AGS人胃腺細(xì)胞
RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞 Rattus
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis
丁酸梭菌 Clostridium butylicom
威德摩爾鏈霉菌 Streptomyces wedmorensis
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
糞產(chǎn)堿菌 Alcaligenes faecalis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
B16/黑色素瘤株國產(chǎn)
棕褐小單孢菌 Micromonospora brunnea
小多孢菌 Micropolyspora sp.
桿菌屬 Lactobacillus sp.
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis
梭形芽胞桿菌 Bacillus fusiformis
WM451, 人黑色素瘤細(xì)胞
深紅正青霉 Eupenicillium rubidurum
V5標(biāo)簽免疫親和介質(zhì)125ul國產(chǎn)
Saos-2,人成骨肉瘤細(xì)胞
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
香菇 Lentinula edodes
丹參酮IIA規(guī)格:1g/支;98%
褐球固氮菌 Bacillus thuringiensis subsp. kumamotoensis
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes Cyanine 5疊氮化物 [相當(dāng)于Cy5疊氮化物]Cyanine 5 azide [equivalent to Cy5 azide]
Cyber Green 20X 水溶液 PCR定量Cyber Green 20X Aqueous PCR Solution
Atpenin A5 (1 mg)3-[(2S,4S,5R)-5,6-dichloro-2,4-dimethyl-1-oxohexyl]-4-hydroxy-5,6-dimethoxy-2(1H)-pyridinone; Antibiotic FO 125A5; Atpenin A5
4-chloro-2,5-DMA (hydrochloride) (5 mg)4-chloro-2,5-dimethoxy-a-methyl-benzeneethanamine, monohydrochloride; 4-chloro-2,5-Dimethoxyamphetamine|DOC; 4-chloro-2,5-DMA (hydrochloride)
2-Pyridylamide oxime (250 mg)N-hydroxy-2-pyridinecarboximidamide; Picolinic Acid Amidoxime; 2-Pyridylamide oxime
Fucoxanthin (10 mg)6’R,7’-didehydro-5R,6-epoxy-4’,5’,6S,7-tetrahydro-3S,3’S,5’R-trihydroxy-β,β-caroten-8(5H)-one; α-Carotene; Fucoxanthin
(E)-C-HDMAPP (ammonium salt) (5 mg)P’-[(3E)-5-hydroxy-4-methyl-3-penten-1-yl]-isohypophosphoric acid, triammonium salt; (E)-1-Hydroxy-2-Methylbut-2-enyl 4-Diphosphate (ammonium salt); (E)-C-HDMAPP (ammonium salt)
(+)-CP 47,497 (solution) (5 mg)2[(1R,3S)-3-hydroxycyclohexyl]-5-(2-methyloctan-2-yl)phenol; (+)-CP 47,497 (solution)
CB-86 (1 mg)N-cyclopropyl-8-[3-(1,1-dimethylheptyl)-5-hydroxyphenoxy]-oct*; CB-86
TPEN (50 mg)N,N,N’,N’-tetrakis(2-pyridinylmethyl)-1,2-ethanediamine; TPEDA; TPEN
小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 +)-Warfarin (10 mg)4-hydroxy-3-[(1R)-3-oxo-1-phenylbutyl]-2H-1-benzopyran-2-one; (R)-Warfarin; (+)-Warfarin
Tiaprost (500 ug)7-[3,5-dihydroxy-2-[3-hydroxy-4-(3-thienyloxy)-1-buten-1-yl]cyclopentyl]-5-heptenoic acid; Iliren; Tiaprost
16-phenyl tetranor Prostaglandin E1 (5 mg)9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-16-phenyl-17,18,19,20-tetranor-prost-13E-en-1-oic acid; 16-phenyl tetranor PGE1; 16-phenyl tetranor Prostaglandin E1