詳細介紹
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Mouse advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Mouse advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設(shè)置復孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人腺細胞英文名稱:MDA-MB-231
Schenk&Hildebrandt MediumBR10升國產(chǎn)/進口
RH-35(大鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2gersion
小鼠骨髓瘤淋巴細胞英文名稱:N-H
酸性肉湯/Acid Broth酸性罐食品無菌試驗250克國產(chǎn)/進口
人前列腺細胞英文名稱:22RV1
TTC卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂/三苯四唑卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂/三苯四氮卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂/紅四氮唑卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂/三苯基四氮唑卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂/TTC Lecithin Tween 80 Nutrient Agar用于妝品中細菌總數(shù)測定250克國產(chǎn)/進口
人肺腺細胞英文名稱:NCI-H1975
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)/Buffered Listeria Enrichment Broth李氏菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
牛津瓊脂基礎(chǔ)/OXA基礎(chǔ)/Oxford Agar Base單增李氏菌的選擇性分離250克國產(chǎn)/進口
大鼠肺大靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
現(xiàn)隱肉湯/Presence Absence Broth水中大腸菌群計數(shù)250克國產(chǎn)/進口
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2
PA-1(人卵巢腺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
MDA-MB-468(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-453(人腺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
MDA-MB-435S(人腺導管細胞)5×106cells/瓶×2
HHCC(人肝細胞)5×106cells/瓶×2
A549(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞Amplite Red HRP底物Amplite Red HRP Substrate
Fluoro-Jade BFluoro-Jade B
GSK 4112 (10 mg)N-[(4-chlorophenyl)methyl]-N-[(5-nitro-2-thienyl)methyl]-1,1-dimethylethyl ester-glycine; GSK 4112
N-Methyltryptamine (10 mg)N-methyl-1H-indole-3-ethanamine; Dipterine|NMT; N-Methyltryptamine
Prostaglandin E1 (10 mg)9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; Alprostadil|PGE1; Prostaglandin E1
Tenovin-6 (1 mg)N-[[[4-[[5-(dimethylamino)-1-oxopentyl]amino]phenyl]amino]thioxomethyl]-4-(1,1-dimethylethyl)-benzamide; Tenovin-6
Splitomicin (1 mg)1,2-dihydro-3H-naphtho[2,1-b]pyran-3-one; 1-Naphthalenepropanoic Acid; Splitomicin
thio-p-Toluamide (500 mg)4-methyl-benzenecarbothioamide; 4-Methylbenzenethioamide; thio-p-Toluamide
Bisindolylmaleimide V (1 mg)3,4-di-1H-indol-3-yl-1-methyl-1H-pyrrole-2,5-dione; Ro 31-6045|BIM V; Bisindolylmaleimide V
Hexacosanoic Acid (100 mg)hexacosanoic acid; Cerotic Acid|Ceric Acid|NSC 4205; Hexacosanoic Acid
N-Benzylacetamidine (hydrobromide) (5 mg)N-(phenylmethyl)-ethanimidamide, monohydrobromide; N-Benzylacetamidine (hydrobromide)
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)elisa試劑盒操作步驟PP242 (5 mg)2-[4-ami-(1-methylethyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-3-yl]-1H-indol-5-ol; PP242
JWH 018-d9 (solution) (1 mg)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-2,2,3,3,4,4,5,5,5-d9-methanone; AM678; JWH 018-d9 (solution)
Sildenafil Citrate (10 mg)5-[2-ethoxy-5-[(4-methyl-1-piperazinyl)sulfonyl]phenyl]-1,6-dihydro-1-methyl-3-propyl-2-hydroxy-1,2,3-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-one; Viagra
20-hydroxy Prostaglandin E2 (50 ug)9-oxo-11α,15S,20-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 20-hydroxy PGE2; 20-hydroxy Prostaglandin E2小鼠脈絡(luò)膜血管細胞*培養(yǎng)基100mL