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小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
貓腎上細(xì)胞英文名稱:CRFK
酪蛋白瓊脂/水解酪蛋白瓊脂/Casein Agar Medium用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腎管狀上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
糖蛋白胨培養(yǎng)液/糖蛋白胨肉湯/Lactose Peptone Broth飲用水中總大腸菌群多管發(fā)酵法檢驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
乙基紫疊氮鈉肉湯/EVA肉湯/EVA Broth用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
RN-c, 大鼠質(zhì)神經(jīng)元
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
NCI-H23(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
人直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
中國(guó)藍(lán)薔薇酸瓊脂250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Ca Ski(人宮頸上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
RWPE1(人前列腺上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株)5×106cells/瓶×2
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞英文名稱:DCS
Bcap-37(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠成年表角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 2-thio-PAF (10 mg)1-O-hexadecyl-2-deoxy-2-thio-S-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; 2-thio-PAF
7-hydroxycoumarinyl Arachidonate (50 mg)5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl ester; Umbelliferyl Arachidonate; 7-hydroxycoumarinyl Arachidonate
SMase Positive Control (1 ea)SMase Positive Control
Glycogen Enzyme Mixture (1 ea)Glycogen Enzyme Mixture
N-(3-pyridyl)-Indomethacin amide (50 mg)N-(3-pyridyl)-1-(4-chlorobenzoyl)-5-methoxy-2-methyl-1H-indole-3-acetamide; N-3PyIA; N-(3-pyridyl)-Indomethacin amide
3,4-Dihydroxyphenyl ethanol (50 mg)4-(2-hydroxyethyl)-1,2-benzenediol; 3-Hydroxytyrosol|Ba2774; 3,4-Dihydroxyphenyl ethanol
Clasto-Lactacystin β-lactone (100 ug)1R-[1S-1hydroxy-2-methylpropyl]-4R-methyl-6-oxa-2-azabicyclo[3。2。0]heptane-3,7-dione; β-Clastolactacystin|Omuralide; Clasto-Lactacystin β-lactone
NO Assay Lactate Dehydrogenase (1 ea)Lactate Dehydrogenase; NO Assay Lactate Dehydrogenase
ODQ (100 mg)1H-[1,2,4]oxadiazolo[4,3-a]quinoxalin-1-one; ODQ
DAF-2 diacetate (1 mg)2-(3,6-diacetyloxy-4,5-diamino-9H-xanthen-9-yl)-benzoic acid; 4,5-Diaminofluorescein diacetate; DAF-2 diacetate
Arachidic Acid (100 mg)Eicosanoic acid; n-Eicosanoic Acid|Arachic Acid|Icosanoic Acid|C20:0|NSC 93983; Arachidic Acid
小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法PtdIns-(1,2-dihexanoyl) (sodium salt) (1 mg)1-(1,2-dihexanoylphosphatidyl)inositol, monosodium salt; PtdIns-(1,2-dihexanoyl) (sodium salt)
JWH 018 N-pentanoic acid metabolite-d4 (100 ug)5-(3-(1-naphthoyl)-1H-indol-1-yl)-pentanoic-3,3,4,4-d4 acid; JWH 018 N-pentanoic acid metabolite-d4
JWH 122 3-methylnaphthyl isomer (1 mg)(3-methylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 122 3-methylnaphthyl isomer