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小鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱(chēng):Mouse anti-human D-Pantothenic Acid mAb 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
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PB-22 4-hydroxyquinoline isomer (1 mg)quinolin-4-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate; PB-22 4-hydroxyquinoline isomer
Ro 25-6981 Maleate (50 mg)αR-(4-hydroxyphenyl)-βS-methyl-4-(phenylmethyl)-2Z-butenedioate-1-piperidinepropanol; Ro 25-6981 Maleate
JFD00244 (1 mg)1,4-bis[[2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]amino]-9,10-anthracenedione; BML-266; JFD00244
CAY10677 (10 mg)5-(2-amino-5-pyrimidinyl)-N,N-diethyl-1-octyl-1H-indole-3-methanamine; Icmt Inhibitor 15; CAY10677
Gemfibrozil (25 g)5-(2,5-dimethylphenoxy)-2,2-dimethyl-pentanoic acid; CI-719|Lopid; Gemfibrozil
Meloxicam (500 mg)4-hydroxy-2-methyl-N-(5-methyl-2-thiazolyl)-1,1-dioxide-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxamide; Coxicam|UH-AC 62XX; Meloxicam
Ondansetron (hydrochloride) (50 mg)1,2,3,9-tetrahydro-9-methyl-3-[(2-methyl-1H-imidazol-1-yl)methyl]-4H-carbazol-4-one, monohydrochloride; Emeset|GR 38032F|NSC 665799|SN 307; Ondansetron (hydrochloride)
ADB-PINACA N-(4-hydroxypentyl) metabolite (1 mg)N-(1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(4-hydroxypentyl)-1H-indazole-3-carboxamide; ADB-PINACA N-(4-hydroxypentyl) metabolite
1,2-Dioleyloxy-3-dimethylamino-propane (100 mg)N,N-dimethyl-2,3-bis[(9Z)-9-octadecen-1-yloxy]-1-propanamine; DODMA|MBN 305A; 1,2-Dioleyloxy-3-dimethylamino-propane
ML-180 (1 mg)6-[4-(3-chlorophenyl)-1-piperazinyl]-3-cyclohexyl-2,4(1H,3H)-pyrimidinedione; CID-3238389; ML-180
小鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗實(shí)驗(yàn)方法Glucoraphanin (potassium salt) (5 mg)((E)-5-(methylsulfinyl)-1-(((2S)-3R,4S,5S-trihydroxy-6R-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-2-yl)thio)pentylidene)amino sulfate, monopotassium salt; Glucoraphanin (potassium salt)
HS Mineral Oil Assay Reagent (15 ml)HS Mineral Oil Assay Reagent
Myristoyl Ethanolamide (5 mg)N-(2-hydroxyethyl)-tetradec*; AM 3165|Comperlan MM|Schercomid MME; Myristoyl Ethanolamide