我司全程提供細(xì)胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾!產(chǎn)品僅用于科研
名稱 淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞
2.組織來源:淋巴管
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介:
人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞分離自淋巴管組織;淋巴管由毛細(xì)淋巴管匯合而成。其形態(tài)結(jié)構(gòu)與靜脈相似,但管徑較細(xì),管壁較薄,瓣膜較多且發(fā)達(dá),外形呈串珠狀。淋巴管根據(jù)其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內(nèi)臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常經(jīng)過一個(gè)或多個(gè)淋巴結(jié),從而把淋巴細(xì)胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。當(dāng)局部感染時(shí),細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞(LEC)是襯覆于淋巴管內(nèi)表面的一種單層扁平上皮,是構(gòu)成淋巴管壁的主要結(jié)構(gòu),參與維持體液平衡,調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞再循環(huán)和機(jī)體的免疫反應(yīng)和組織液及蛋白質(zhì)的運(yùn)輸,在疾病過程中也起著重要作用。近年研究表明,LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴(kuò)散等病理過程中起重要作用,而且與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能:①調(diào)節(jié)體液、蛋白和組織壓力平衡;②為免疫系統(tǒng)的重要組成部分。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴結(jié)核。
5.方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞采用中性蛋白酶消化法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)VEGFR3免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
使用方法:
收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
黃色短桿菌 嗜熱乳酸鏈球菌
丁醇梭菌(丁醇桿菌) 乳酸片球菌
金霉素鏈霉菌 表皮葡萄球菌ATCC12228凍干粉
馬鏈球菌獸疫亞種 雅致枝霉
金黃色葡萄球菌(敏感菌株)ATCC25923凍干粉 紅法夫酵母
大鼠黃體激素(LH)elisa檢測試劑盒
大鼠脫氫酶(XDH)elisa檢測試劑盒
大鼠緩激肽受體B2(BDKRB2)elisa檢測試劑盒
大鼠緩激肽(BK)elisa檢測試劑盒
大鼠環(huán)腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH)elisa檢測試劑盒
淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞牛孕酮(PROG)elisa檢測試劑盒
牛組胺(HIS)elisa檢測試劑盒
濃縮型SABC-Cy3免疫熒光試劑盒 1盒400張片
濃縮型SABC-FITC免疫熒光試劑盒 1盒400張片
諾氟沙星殘留ELISA檢測試劑盒(抗生素殘留)
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。