詳細(xì)介紹
我司全程提供細(xì)胞生物體、生長(zhǎng)特性、來(lái)源、器官、類(lèi)型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說(shuō)明書(shū)信息,我們專(zhuān)業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),讓您實(shí)驗(yàn)再無(wú)煩擾!產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0866 |
名稱(chēng) 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞
2.組織來(lái)源:肝臟組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(SEC)是肝臟內(nèi)所占比例高的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞,位于肝竇腔與肝細(xì)胞之間,具有物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細(xì)胞所沒(méi)有的窗孔結(jié)構(gòu)、細(xì)胞間連結(jié)松散、內(nèi)皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,從而達(dá)到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時(shí),肝竇內(nèi)皮細(xì)胞窗孔逐漸減少或消失,內(nèi)皮下基膜形成,產(chǎn)生類(lèi)似于連續(xù)型毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu),這一過(guò)程稱(chēng)為肝竇毛細(xì)血管化。它由多種因素引起,其過(guò)程極復(fù)雜,在多種肝病的發(fā)病前期階段均有出現(xiàn),近年來(lái)受到廣泛關(guān)注。
5.方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心、密度梯度離心法,并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31、CD14免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
使用方法:
收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
焦曲霉 硝基還原假單胞菌
盲腸腸球菌 五通橋毛霉
巴西毛殼 鏈格孢
產(chǎn)黃纖維單胞菌 紡綞形賴(lài)芽孢桿菌
凍干粉 停乳鏈球菌
大鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠抗環(huán)胍肽抗體(Anti-CCP-antibody)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠抗弓形蟲(chóng)IgM抗體elisa分析檢測(cè)試劑盒
肝竇內(nèi)皮細(xì)胞人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)elisa檢測(cè)試劑盒
人B細(xì)胞活化因子(BAFF)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人B細(xì)胞活化因子(BAFF)elisa檢測(cè)試劑盒
人B細(xì)胞活化因子(BAFF)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)elisa分析檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。