詳細介紹
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1140 |
名稱 大鼠脂肪干細胞
2.組織來源:脂肪組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
大鼠脂肪干細胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成,聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內皮功能、纖溶活動及炎癥反應,參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內分泌系統(tǒng)。脂肪干細胞(ADSCs)是一種具有多向分化潛能的干細胞,主要恢復組織細胞的修復功能,促進細胞的再生,恢復年輕面容的同時,身體機能也得到充分改善,有效改善亞健康、早衰等疾病,由內而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細胞具有很多優(yōu)點:①具有自我更新及多向分化的潛能;②來源充足;③對供區(qū)的創(chuàng)傷較?。虎塬@得率及體外擴增速率高。脂肪干細胞是目前被廣泛應用于組織工程領域中理想的種子細胞。
5.方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠脂肪干細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠脂肪干細胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
盤長孢菌(魯保一號) 大腸桿菌
沙保羅葡萄糖瓊脂表面培養(yǎng)基60mm/25cm2 熱帶靈芝
雙歧雙歧桿菌 皺木耳
匣狀粘球菌 三七根腐病菌Cylindrocarponsp.
路德類酵母 安絡小皮傘菌、鬼毛針、黑柄皮傘菌
大鼠誘導型一氧化合成酶(iNOS)elisa檢測試劑盒
大鼠誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)elisa檢測試劑盒
大鼠游離脂肪酸(FFA)elisa檢測試劑盒
大鼠游離原卟啉(FEP)elisa檢測試劑盒
大鼠游離三碘甲狀腺原(Free-T3)elisa檢測試劑盒
大鼠脂肪干細胞人桿狀病毒IAP重復包含蛋白2/3(BIRC2/3)elisa分析檢測試劑盒
人桿狀病毒IAP重復包含蛋白2/3(BIRC2/3)elisa檢測試劑盒
人干擾素a-抗體(Anti-IFN-ab)elisa分析檢測試劑盒
人干擾素a-抗體(Anti-IFN-ab)elisa檢測試劑盒
人干擾素活化基因205(Ifi205)elisa分析檢測試劑盒
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