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我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1152 |
名稱 大鼠終板軟骨細胞
2.組織來源:椎間盤組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
大鼠終板軟骨細胞分離自椎間盤終板軟骨組織;椎體終板是椎體在生長發(fā)育過程中,椎體上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板,呈輕度凹陷,即為骨性終板。椎體終板的中央仍為一薄層透明軟骨覆蓋,并終生存在,即為軟骨終板,上下軟骨終板與髓核和纖維環(huán)連接共同構成椎間盤。椎體終板構成了椎間盤的上下邊界,位于椎體中心的松質骨和椎間盤之間。是由軟骨下骨和厚度相當?shù)母采w其上的軟骨組成。主要作用是防止椎間盤髓核組織嵌入椎體,同時具有平衡分散應力的作用。成熟的終板軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些終板軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,終板軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,終板軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的終板軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
5.方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠終板軟骨細胞采用膠原酶-中性聯(lián)合消化并結合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠終板軟骨細胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
前列腺上皮細胞生長因子5mL dNTP 溶液,100mM 0.5mL
前脂肪細胞生長因子5mL dNTP 溶液 ,10mM5mL
乳腺上皮細胞生長因子5mL dNTP 溶液 ,10mM0.5mL
上皮細胞生長因子5mL dNTP 溶液 ( 標記專用 )0.5mL
上皮細胞生長因子 -25mL dNTP 和引物清除劑100 次
大鼠粘蛋白2(MUC2)elisa檢測試劑盒
大鼠粘蛋白1(MUC1)elisa檢測試劑盒
大鼠早老素2(PS2)elisa檢測試劑盒
大鼠早老素1(PSEN1)elisa檢測試劑盒
大鼠再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)elisa檢測試劑盒
大鼠終板軟骨細胞人脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)elisa分析檢測試劑盒
人轉移酶2抗體(IgA)elisa分析檢測試劑盒
人轉移酶2抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒
人轉移酶6抗體(IgM)elisa分析檢測試劑盒
人甘肽(GSH)elisa分析檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。