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          大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞

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          • 大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞

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          • 型號(hào)
          • 品牌 R&D/美國(guó)
          • 廠(chǎng)商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-13 14:33:41瀏覽次數(shù):135

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號(hào) GOY-01X1365 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞公司其它各種產(chǎn)品人血紅素加氧酶(HO)elisa檢測(cè)試劑盒
          人血紅素加氧酶1(HO-1)elisa檢測(cè)試劑盒
          人血紅素加氧酶2(HO-2)elisa檢測(cè)試劑盒
          人血漿酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)elisa檢測(cè)試劑盒
          人血清白蛋白(HSA)elisa檢測(cè)試劑盒

          詳細(xì)介紹

          冷凍保存細(xì)胞之方法?
          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱(chēng)

          大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞

          規(guī)格

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號(hào)

          GOY-01X1365

          名稱(chēng)    大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞
          2.組織來(lái)源:腎上腺組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞分離自腎上腺組織;腎上腺是人體相當(dāng)重要的內(nèi)分泌器官,由于位于兩側(cè)腎臟的上方,故名腎上腺。腎上腺左右各一,位于腎的上方,共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹。左腎上腺呈半月形,右腎上腺為三角形。從側(cè)面觀察,腺體分腎上腺皮質(zhì)和腎上腺髓質(zhì)兩部分,周?chē)糠质瞧べ|(zhì),內(nèi)部是髓質(zhì)。腎上腺內(nèi)部是髓質(zhì)部分,分泌腎上和。這些激素在應(yīng)激狀態(tài)釋放增多,能夠幫助升高血壓,加快心率,升高血糖,動(dòng)員全身的儲(chǔ)備物質(zhì),為機(jī)體與外界環(huán)境的抗?fàn)幾骱贸浞譁?zhǔn)備。腎上腺外部是皮質(zhì)部分,分泌醛固酮、和少量的雌雄激素。醛固酮能夠促進(jìn)小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收,正常數(shù)量的醛固酮,對(duì)維持人體正常血壓有重要作用。但是如果過(guò)多分泌,會(huì)導(dǎo)致高血壓和低血鉀。是人體必需的激素之一。當(dāng)人體處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí),比如感冒,發(fā)燒,遇到突發(fā)事件的時(shí)候,腎上腺皮質(zhì)分泌大量的,這些能夠動(dòng)員機(jī)體的存儲(chǔ)能源,為應(yīng)對(duì)內(nèi)部或者外部重要事件提供充分的物質(zhì)準(zhǔn)備。當(dāng)缺乏時(shí),機(jī)體在遇到重大事件的時(shí)候,往往缺乏足夠應(yīng)對(duì)能力,容易被病毒或外界壓力所擊倒。腎上腺產(chǎn)生的雄激素,對(duì)男性來(lái)講,但是對(duì)女性而言,是雄激素的一個(gè)重要來(lái)源。

          5.方法簡(jiǎn)介:

          公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測(cè):

          公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

          培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

          換液頻率 2-3天換液一次

          生長(zhǎng)特性 貼壁

          細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

          傳代特性 可傳1-3代左右;2代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳

          消化液 0.25%

          培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

          培養(yǎng)操作:
          1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
          2
          )細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          1.
          棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
          2.
          1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
          3.
          6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
          4.
          將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3
          )細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi);
          1.
          細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
          2. 4 min 1000rpm
          離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
          3.
          將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
          填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5  接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol

          DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒10   接頭 DNA(pSma I)5nmol

          dNTP 溶液 ( 標(biāo)記專(zhuān)用 )0.5mL  接頭 DNA(Hind -Sma I)5nmol

          標(biāo)記 dUTP 溶液50μL  接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol

          Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL  接頭 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol
          EB病毒核抗原3A抗體(IgG)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

          EB病毒核抗原1(EBNA1)抗體(IgG)elisa檢測(cè)試劑盒

          EB病毒IgA(EBv IgA)elisa檢測(cè)試劑盒

          EB病毒(Ebv)抗體(IgM)elisa檢測(cè)試劑盒

          EB病毒(EBv)抗體(IgG)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
          大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞小鼠白介素9(IL-9)elisa分析檢測(cè)試劑盒

          小鼠白介素9(IL9)elisa檢測(cè)試劑盒

          小鼠白介素9(IL-9)elisa檢測(cè)試劑盒

          小鼠白三烯A4水解酶(LTA4H)elisa檢測(cè)試劑盒

          小鼠白三烯B4(LTB4)elisa分析檢測(cè)試劑盒
          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
          產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
          1
          、無(wú)菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大?。?/span>
          2
          、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
          3
          、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
          4
          、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
          5
          、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
          二、免疫熒光鑒定:
          1
          、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
          2
          、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
          3
          、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
          4
          、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
          5
          PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
          6
          、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


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