細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
大鼠白膜成纖維細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1413 |
名稱 大鼠白膜成纖維細(xì)胞
2.組織來源: 白膜組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠白膜成纖維細(xì)胞分離自白膜組織;海綿體,又稱海綿體肌,是硬的平滑肌和結(jié)締組織。海綿體是一種勃起組織,外面包有堅(jiān)厚的白膜,內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架,其腔隙與血管相通。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的白膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。白膜成纖維細(xì)胞(PLFs)作為牙周膜的主體細(xì)胞,是牙周膜主要的間質(zhì)細(xì)胞,它不僅具有合成膠原、基質(zhì)、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過程?,F(xiàn)在,利用牙周膜細(xì)胞建立體外模型,已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。
本公司的大鼠白膜成纖維細(xì)胞采用膠原酶-聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM[H]、FBS、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
使用方法:
收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
豌豆根瘤菌 蘇云金芽胞桿菌以色列亞種 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis
空腸彎曲桿菌 總狀毛霉
嗜熱脂肪芽孢桿菌ATCC7953凍干粉 臥孔菌
銀絲菇、絲蓋小包腳菇 印第安那亞種Bacillusthuringiensissubsp.indiana
痢疾志賀氏菌 蛹蟲草(北冬蟲夏草、北蟲草)
人β1,4-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶2(B4GALNT2)elisa檢測(cè)試劑盒
人β,β胡蘿卜素9',10'加氧酶(BCO2)elisa檢測(cè)試劑盒
人α-烯醇化酶(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)elisa檢測(cè)試劑盒
人α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDHC)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
人α乳清蛋白(α-La)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白膜成纖維細(xì)胞小鼠端粒酶(TE)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠對(duì)氨基苯甲酸(PABA)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠對(duì)氧磷酶1(PON1)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠對(duì)氧磷酶2(PON2)elisa檢測(cè)試劑盒
我司全程提供細(xì)胞生物體、生長(zhǎng)特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾!產(chǎn)品僅用于科研