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我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!產(chǎn)品僅用于科研
名稱 DC細胞
產(chǎn)品概述
DC細胞,即樹突狀細胞(Dendritic Cell)是正常人體內(nèi)存在的一種具有強大的抗原提呈功能的一類特殊的細胞,被喻為機體的“天然佐劑"。2011年10月3日,瑞典卡羅琳醫(yī)學院在斯德哥爾摩宣布,2011年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予加拿大科學家拉爾夫·斯坦曼、生于盧森堡的法國籍科學家朱爾斯·霍夫曼以及美國科學家布魯斯·博伊特勒,以表彰他們在免疫學領(lǐng)域取得的革命性研究成果。其中,斯坦曼(RalphM·Steinman)教授,因其在免疫系統(tǒng)領(lǐng)域以及樹突狀細胞(Dendritic cell簡稱DC)等一系列研究發(fā)現(xiàn),獨享獎金的一半,另外一半由其他兩位科學家分享。被譽為“DC細胞之父"的斯坦曼教授在2006年就查出胰腺癌晚期。在醫(yī)學上,晚期胰腺癌的惡化程度高,生存期不會超過6個月。然而,斯坦曼教授正是在接受了以他自己的研究成果“樹突細胞"(DC細胞)為依據(jù)的細胞后,成功地將生命延長。
DC細胞抗腫瘤機制如下:
a)DC可以高表達MHC-Ⅰ類和MHC-Ⅱ類分子,MHC分子與其捕獲加工的腫瘤抗原結(jié)合,形成肽-MHC分子復合物,并遞呈給T細胞,從而啟動MHC-I類限制性CTL反應和MHC-Ⅱ類限制性的CD4+Thl反應。同時,DC還通過其高表達的共刺激分子(CD80/B7-1、CD86/B7-2、CD40等)提供T細胞活化所必須的第二信號,啟動了免疫應答。
b)DC與T細胞結(jié)合可大量分泌IL-12、IL-18激活T細胞增殖,誘導CTL生成,主導Th1型免疫應答,利于腫瘤清除;激活穿孔素P顆粒酶B和FasL/Fas介導的途徑增強NK細胞毒作用;
c)DC分泌趨化因子(Chemotactic Cytokines,CCK)專一趨化初始型T細胞促進T細胞聚集,增強了T細胞的激發(fā)。保持效應T細胞在腫瘤部位長期存在,可能通過釋放某些抗血管生成物質(zhì)(如IL-12、IFN-γ)及前血管生成因子而影響腫瘤血管的形成。上述CCK進一步以正反饋旁分泌的方式活化DC,上調(diào)IL-12及CD80、CD86的表達;同時DC也直接向CD8+T細胞呈遞抗原肽,在活化的CD4+T細胞輔助下使CD8+T細胞活化,CD4+和CD8+T細胞還可以進一步通過分泌細胞因子或直接殺傷,增強機體抗腫瘤免疫應答。
DC刺激免疫反應有以下特點:
1.樹突狀細胞(DC)是人體內(nèi)功能強的專職抗原遞呈細胞,DC相當于信使,將抗原信息傳遞給T細胞,并具有活化T細胞的功能,很少量就可以激發(fā)強大的T細胞反應。
2.可致敏輔助T細胞的多種細胞因子,顯著刺激初始型T細胞增殖,以激活體內(nèi)靜止狀態(tài)的初始型T細胞(而巨噬細胞、B細胞僅能刺激已活化的或記憶性T細胞)。
3.幫助重建腫瘤患者對腫瘤細胞的免疫監(jiān)視功能。機體的免疫系統(tǒng)具有完備的監(jiān)視功能,但腫瘤細胞對機體的免疫系統(tǒng)有抵抗和抑制作用,使得免疫細胞不能識別和殺傷腫瘤細胞。在DC疫苗培養(yǎng)中用腫瘤抗原誘導DC使其致敏后,可將其抗原信息傳遞給T細胞,使T細胞重新識別和殺傷腫瘤細胞。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
細胞分裂周期調(diào)控蛋白45抗體
細胞分裂周期蛋白CDC123抗體
鋅指蛋白830抗體
中心體蛋白質(zhì)76抗體
中心體蛋白152抗體
人γ分泌酶elisa檢測試劑盒
人γ氨基丁酸(GABA)elisa檢測試劑盒
人β-轉(zhuǎn)導素重復序列包含蛋白(BTRC)elisa檢測試劑盒
人β抑制蛋白2(ARRB2)elisa檢測試劑盒免費代測
人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)elisa檢測試劑盒
DC細胞小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)elisa分析檢測試劑盒
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)elisa檢測試劑盒
小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)elisa分析檢測試劑盒
小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)elisa檢測試劑盒
小鼠肺部激活調(diào)節(jié)趨化因子(PARC)elisa檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。