詳細(xì)介紹
植物種屬鑒定 PCR Mix 11100 次*使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
3. 電泳檢測(cè)是否得到預(yù)計(jì)長(zhǎng)度的 PCR 產(chǎn)物。
植物種屬鑒定 PCR Mix 11100 次*產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專(zhuān)門(mén)為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
產(chǎn)品介紹:
規(guī)格及成分:
Clostridium ljungdahlii medium
Desulfitobacterium frappieri medium
Desulfurispirillum medium
Filobacillus milosensis medium
Haloanaerobium congolense medium
Howardella medium
Magnetovibrio medium
Methanobacterium ii medium
Methylohalomonas medium
Modified methanobacterium medium
Oceanithermus medium
Pseudobutyrivibrio medium
黑曲霉 Aspergillus niger
大鼠晶狀體上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
酸桿菌屬* Lactobacillus sp.
苜蓿中華根瘤菌
SK-N-MC(人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuum
毛柄金錢(qián)菌(金針菇) Flammulina velutipes
田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans
Acc-2(人涎腺腺樣囊性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
雅致放射毛霉 Actinomucor elegans
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
PC-3M-IE8(人前列腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)5×106cells/瓶×2gersion
粘質(zhì)沙雷氏菌 Serratia marcescens
黑木耳 Auricularia auricula
中分子量單一蛋白Marker(35 kD)50次國(guó)產(chǎn)
小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Rhodovulum marinum medium
Spirochaeta coccoides medium
Syntrophococcus sucromutans medium
Thermosulfidibacter medium