詳細(xì)介紹
G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹:
G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實(shí)驗(yàn)步驟規(guī)格及成分:
G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實(shí)驗(yàn)步驟使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預(yù)計(jì)長度的 PCR 產(chǎn)物。
暫無 Saccharomyces boulardii
黑木耳 Auricularia auricula
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒規(guī)格:500次
小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
NCI-H2227(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
郎必可假絲酵母 Candida lambica
小鼠前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠滑膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
LX-2, 人肝星形細(xì)胞株
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
佛羅里達(dá)側(cè)耳 Pleurotus florida
小鼠垂體瘤細(xì)胞英文名稱:MMQ
人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL多聚甲醛(0.1M PBS,pH7.4)溶液,4%
Mallory蘇木精染色液
Mallory三色染色法結(jié)締組織染色試劑盒
Pal Weigert染色法神經(jīng)組織染色試劑盒
薄片組織嗜鉻反應(yīng)法特殊細(xì)胞染色試劑盒
硫堇染色法粘多糖染色試劑盒
Holt-Withers滇吲哚酚法非特異脂酶顯色試劑盒
Stovall-Black涅格里體法病毒包涵體染色試劑盒
BES Buffered Saline,2X
Carbonate Buffer(碳酸鹽緩沖液),0.5M,pH9.5
EGTA Solution(EGTA溶液),0.5M,pH8.0
G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實(shí)驗(yàn)步驟HEPES Buffer,1M,pH7.4
Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH2.5
MOPSO Buffer,0.2M,pH6.0
Phosphate Buffer,0.5M, pH9.5
Proteinase K Solution(蛋白酶K溶液),10mg/mL