詳細介紹
T3 體外轉錄試劑盒50 次*使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數的 PCR(循環(huán)數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預計長度的 PCR 產物。
T3 體外轉錄試劑盒50 次*產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
產品介紹:
規(guī)格及成分:
NCI-H446(人小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
小鼠神經干細胞(EGFP標記)
大鼠成年表皮角質形成層細胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞)5×106cells/瓶×2
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
白靈側耳 Pleurotus nebrodensis人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA Kit
人白介素16(IL-16)ELISA Kit
人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA Kit
人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA Kit
人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA Kit
人肝素結合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA Kit
人紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA Kit
人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA Kit
人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA Kit
人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA Kit
人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體(HBcAb-IgM)ELISA Kit
人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因 ELISA Kit
人毛細血管擴張性共濟失調突變基因(ATM)ELISA Kit
人凝血酶血栓調節(jié)蛋白復合物(T-TM)ELISA Kit
人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA Kit
人生長激素釋放肽gHRelin(GHRP-GHRelin)ELISA Kit
人糖胺聚糖(GAG)ELISA Kit
人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA Kit
小鼠肺細胞英文名稱:Lewis
人視網膜微血管內皮細胞*培養(yǎng)基100mL
無花果曲霉 Aspergillus ficuum
厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
HO-8910(人卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
塔賓曲霉 Aspergillus tubingensis
香菇 Lentinula edodes