詳細(xì)介紹
單細(xì)胞全基因組擴增試劑盒30 次*使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預(yù)計長度的 PCR 產(chǎn)物。
單細(xì)胞全基因組擴增試劑盒30 次*產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
產(chǎn)品介紹:
規(guī)格及成分:
草魚胚胎細(xì)胞英文名稱:CP-88
宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.
側(cè)耳 Pleurotus sp.
細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格:200次
EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞
煙曲霉 Aspergillus fumigatus
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
泡盛曲霉 Aspergillus awamoriDesulfuromonas acetexigenes medium
Flexibacter medium
Halobacillus medium
Hydrogenobacter halophilus medium
Mannitol-yeast extract-peptone
Methanobrevibacter cuticularis medium
Methylophaga sulfidovorans medium
Modified sme medium
Opitutus medium
Pseudothermotoga lettingae medium
Roseicyclus medium
Spirochaeta sp. Medium
Syntrophothermus medium
Thermotoga hypogea medium
Trypticase soy broth agar
Zavarzinella formosa medium
大腸桿菌JM107菌種
293 001A細(xì)胞株
酸鏈球菌 Lactococcus lactis
HCT 116(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
黑曲霉 Aspergillus niger
大鼠腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis
阿舒假囊酵母 Crebrothecium ashbyii