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          即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次成分

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          • 即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次成分

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          更新時(shí)間:2017-02-09 20:55:24瀏覽次數(shù):432

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次成分運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 有效期為一年。

          詳細(xì)介紹

          即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次成分使用方法:
          1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
          2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
          3. 電泳檢測(cè)是否得到預(yù)計(jì)長(zhǎng)度的 PCR 產(chǎn)物。

          即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次成分產(chǎn)品及特點(diǎn):
          易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門(mén)為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
          1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
          2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
          3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
          4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
          5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。 
          產(chǎn)品介紹:

          規(guī)格及成分:

          pcDNA3.1(+)/CAT(pcDNA3.1CAT) (60908-1450)
          pcDNA6/myc-His A(pcDNA6mycHisA)
          pCMV-3Tag-9(pCMV3Tag9)
          pCMV6-AC-HA-His(pCMV6ACHAHis)
          pcopneo
          pDB.GST
          pDR540
          pECFP-MEM (pECFPMEM)(60908-2551)
          pENTR3C(60908-2730)
          pET-3d(pET3d,pET-3d(+)(60908-2739)y
          pET22b-CPDSacI(pET22bCPDSacI)
          pFA6a-13Myc-His3MX6(pFA6a13MycHis3MX6)
          pFD666
          pGAD53m(60908-3446)
          pGEX-5X-2(pGEX5X2)
          pGL4.37[luc2P ARE Hygro](60908-4001)
          pGWF1
          phRG-TK毛柄金錢(qián)菌(金針菇) Flammulina velutipes
          蘇云金芽胞桿菌莫氏變種 Bacillus thuringiensis var. merrisoni
          III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
          托姆青霉 Penicillium thomii
          玫瑰小雙孢菌 Microbispora rosea
          C127(小鼠腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
          地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
          三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii
          SW1116(人結(jié)腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
          植物桿菌 Lactobacillus plantarum
          粗柄羊肚菌 Morchella crassipas
          人小氣道平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
          U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 Human
          地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
          大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
          Calu-1(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
          爪哇根霉 Rhizopus javanicus
          尿素八疊球菌 Sarcina ureae
          DAB Kit/DAB顯色試劑盒20m、60ml國(guó)產(chǎn)
          戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
          鏈輪枝菌 Streptoverticillium sp.
          pIEx-10(pIEx10)
          pIZ/V5-HIS(pIZV5HIS)(60908-4341)
          pJSC73
          pL1

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