詳細介紹
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次特點使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預(yù)計長度的 PCR 產(chǎn)物。
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次特點產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次特點產(chǎn)品介紹:
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次特點規(guī)格及成分:
兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit
豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA Kit
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA Kit
小鼠丙二醛(MDA)ELISA Kit
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA Kit
小鼠抗紅細胞抗體(RBC)ELISA Kit
小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISA Kit
小鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA Kit
小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA Kit
鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit
豬白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA Kit
豬髓過氧化物酶(MPO)ELISA Kit
6-磷酸葡萄糖鋇鹽
L-苯丙氨酸
X-Gluc(5-溴-4-氯-3-吲哚葡萄糖苷)桿菌屬 Lactobacillus sp.
根瘤菌
U14(小鼠子宮頸細胞)5×106cells/瓶×2
日本曲霉 Aspergillus japonicus
燕麥鐮孢
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺細胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌 Lactococcus lactis
苜蓿中華根瘤菌
SF126(人腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次特點百脈根根瘤菌 Rhizobium loti
P19(小鼠畸胎瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
丁酸鈉
甲叉雙丙烯酰胺
硫酸新霉素