詳細介紹
MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL*使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預計長度的 PCR 產物。
MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL*產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
產品介紹:
規(guī)格及成分:
一管式拭子DNAout
一步式細菌DNAout
硅膠膜離心吸附柱(小提)收集器(見關聯(lián)產品)
柱式血清血漿DNAout(見關聯(lián)產品)
96孔板質粒DNAout(離心法)
非凍型拭子DNA保存液(A型)
柱式植物油DNAout
一步法96孔板單菌落質粒DNAout(真空法)(見關聯(lián)產品)
DNA堿性膠上樣液(10 mL)膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus
Eca-109(人食管細胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
KiMA(人胚腎上皮細胞系)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
腐皮鐮孢馬特變種 Fusarium solani var. marttii
肺腺英文名稱:GLC-82
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
小鼠胰腺導管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
人大隱靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
BT-20(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
96孔板PCR片段純化回收試劑盒(離心法)(1次)
核酸雜交
dNTP溶液,10mM(5 mL)
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒
質粒(載體)系列產品
農桿菌AGL1感受態(tài)細胞