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          甲酰胺,PCR 級5mL實(shí)驗(yàn)步驟

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          更新時(shí)間:2017-02-09 19:41:42瀏覽次數(shù):535

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          甲酰胺,PCR 級5mL實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 有效期為一年。

          詳細(xì)介紹

          甲酰胺,PCR 級5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):

          易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
          1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
          2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
          3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
          4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
          5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。 
          甲酰胺,PCR 級5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹:

          規(guī)格及成分:

          使用方法:
          1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
          2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
          3. 電泳檢測是否得到預(yù)計(jì)長度的 PCR 產(chǎn)物。

          Rubritalea medium
          Sporohalobacter lortetii medium
          Tea fungus medium
          Thermotoga tf(d) medium
          Tryptone thioglycolate medium
          YPDG液體培養(yǎng)基
          大腸桿菌M15菌種
          293sars181A細(xì)胞株
          Bel-7404細(xì)胞株
          COS-7 SV40細(xì)胞株
          HEC-1-B [HEC1B]細(xì)胞株
          L-O2 [LO2]細(xì)胞株
          MOLT-4 [MOLT4]細(xì)胞株釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
          豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
          HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
          植物桿菌 Lactobacillus plantarum
          根瘤菌 Rhizobium sp.
          大鼠肝細(xì)胞英文名稱:CBRH-7919
          青霉屬 Penicillium sp.
          黑曲霉 Aspergillus niger
          大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
          OVCAR-3(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
          桿菌屬 Lactobacillus sp.
          苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
          TE-13(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
          酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
          猴菌
          P815細(xì)胞株
          SH2細(xì)胞株
          VE細(xì)胞株
          酸性磷酸酶檢測試劑盒

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