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          昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞;Sf21說(shuō)明書(shū)

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          • 品牌 ATCC
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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-01-23 15:28:38瀏覽次數(shù):975

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          昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞;Sf21說(shuō)明書(shū)售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

          詳細(xì)介紹

          昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞;Sf21說(shuō)明書(shū)【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

          細(xì)胞名稱 昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞;Sf21說(shuō)明書(shū)
          形態(tài)特性  圓形,多形
          生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
          特征特性  該細(xì)胞系源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織,是Sf9細(xì)胞的克隆系,可以用于昆蟲(chóng)病毒的基礎(chǔ)研究和復(fù)制桿狀病毒表達(dá)載體。 
          培養(yǎng)條件  Grace's Insect Medium (GIM w/o BSA, FCS, Whole Egg Ultrafiltrate)  10%FBS
          傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
          傳代情況 C11
          凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
          支原體檢測(cè) 陰性
          STR 
          同工酶 同工酶鑒定
          染色體 
          使用權(quán)限 A類

          細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
          1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
          2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
          3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
          二、細(xì)胞處理:
          1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
          2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
          2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
          3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
          4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
          質(zhì)量保證:    
          我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
          操作步驟:
          1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
          2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

          SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺細(xì)胞 Human
          鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
          蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
          SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
          溝腸桿菌 Enterobacter cloacae
          牛糞枝孢 Cladosporium stercorarium
          膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
          小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse
          異常畢赤酵母 Pichia anomala
          豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
          HPAC(人胰腺腺泡上皮)5×106cells/瓶×2
          瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus
          刺孢吸水鏈霉菌北京變種 Streptomyces hygrospinosus var. beigingenis
          大鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
          檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum
          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
          大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
          BC-019(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
          植物桿菌 Lactobacillus plantarum
          根瘤菌 Rhizobium sp.CUPROUS TRIFLUOROMETHANESULFONATE TOLUENE COMPLEX    三烷磺酸亞銅絡(luò)合物(2:1)    48209-28-5
          Disodium pytophosphate    焦磷酸二氫二    7758-16-9
          2-Methyl-4,6-dinitrophenol    4,6-二基鄰酚    534-52-1
          Bis(4-amino-2-chloro-3,5-diethylphenyl)methane    4,4'-亞基雙(3--2,6-二乙基胺)    106246-33-7
          FETAL BOVINE SERUM USA ORIGIN    胎牛血清    
          2,8-BIS(TRIFLUOROMETHYL)-4-BROMOQUINOLINE    4-溴-2,8-二(三基)喹啉    35853-45-3
          N,N,N',N'-TETRAKIS(2-HYDROXYETHYL)ETHYLENEDIAMINE    N,N,N',N'-四(2-羥乙基)乙    140-07-8
          2-Chloro-4-hydroxypyridine    2--4-羥基吡啶    17368-12-6
          METHYL 3-MORPHOLINOPROPIONATE    4-啉丙酸酯    33611-43-7
          Tetrahydropyran    四氫吡喃    142-68-7
          3,5-Dichlorobenzylamine    3,5-二芐胺    39989-43-0
          Ethyl (4-methylthiophenyl)acetate    4-硫基乙酸乙酯    14062-27-2
          2-N-HEXYLCYCLOPENTANONE    2-己基環(huán)    13074-65-2
          L-Asparagine tert-butyl ester    L-天冬酰胺叔丁酯    25456-86-4
          4-Nitrotoluene    對(duì)基    99-99-0
          tert-Butyl carbazate    叔丁氧羰基肼    870-46-2
          2-Methylpyrimidine    2-基嘧啶    5053-43-0
          Protopine    原阿片    130-86-9

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