詳細(xì)介紹
鯉魚尾鰭細(xì)胞;YZ16價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
鯉魚尾鰭細(xì)胞;YZ16價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 鯉尾鰭細(xì)胞由長江水產(chǎn)所建立鑒定,用于鯉尾鰭魚基礎(chǔ)研究和病毒疾病防治研究。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C15
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
5637(人膀胱細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
百脈根根瘤菌 Rhizobium loti
P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
正灰綠正青霉 Eupenicillium euglaucum
雙孢蘑菇
伊紅染色液規(guī)格:100ml
小鼠甲狀腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
副干酪桿菌 Lactobacillus paracasei
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
馬杜拉放線菌 Actinomadura sp.
負(fù)鼠腎細(xì)胞英文名稱:OK
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
小鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
植物桿菌 Lactobacillus plantarumNA 硅烷化102白擔(dān)體
SODIUM DIHYDROGEN CITRATE 檸檬酸二氫 18996-35-5
Z-PHG-OH Cbz-L-甘氨酸 53990-33-3
Silver 銀粉 7440-22-4
5,6-BENZOQUINOLINE 5,6-并喹啉 1985/2/9
N/A 中性蛋白酶
4-Bromocumene 4-溴異丙 586-61-8
MONOLINURON 綠谷隆 1746-81-2
1,1'-Bis(diphenylphosphino)ferrocene-palladium(II)dichloride dichloromethane complex [1,1'-雙(二-基膦基)二茂鐵]化鈀(II),二烷復(fù)合物(1:1) 95464-05-4
6-Hydroxyindole 6-羥基吲哚 2380-86-1
4-PROPYLANILINE 對丙基胺 2696-84-6
1-Phenyl-4-methyl-3-pyrazolidone 1-基-4-基-3-吡唑烷 2654-57-1
BOC-D-CYCLOPROPYLALANINE-DCHA BOC-D-環(huán)丙基丙氨酸 89483-09-0
Nortropine 去托品醇 538-09-0
3,3'-Sulfonyldianiline 3,3'-二氨基二砜 599-61-1
2-METHOXY-5-TRIFLUOROMETHOXY-BENZYLAMINE 2-氧基-5-三氧基芐胺 771582-58-2
4'-Ethoxyacetophenone 4-乙氧基乙 1676-63-7
BOC-L-Isoleucine BOC-L-異亮氨酸 13139-16-7
Aluminium chloride hexahydrate 化鋁,六水 7784-13-6
(S)-(-)-Propylene oxide (S)-(-)-環(huán)氧丙烷 16088-62-3