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詳細(xì)介紹
牛甲狀腺細(xì)胞系；hTERT-BTY價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
牛甲狀腺細(xì)胞系；hTERT-BTY價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
GBC-SD, 人膽囊細(xì)胞
小鼠外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑 40ml 國產(chǎn)
小鼠成纖維細(xì)胞 英文名稱： NIH 3T3
Hanks’ Balanced Salt Solution 規(guī)格： 500ml
人胃順鉑耐藥株 英文名稱： SGC7901/DDP
M17肉湯/M17 Broth 牛奶和制品中酸菌檢測和分離培養(yǎng) 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
腸道菌增菌肉湯/腸道菌增菌液/EE肉湯/Enterobacteria Enrichment Broth 腸道菌的增菌培養(yǎng) 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人白血病細(xì)胞 英文名稱： U973
克雷伯氏顯色培養(yǎng)基 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
大鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
全胃蛋白胨 BR 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
Western Blot封閉液Ⅰ(BSA,pH7.5)/Blocking Buffer(BSA) 500ml 100ml、500ml
胰蛋白胨水培養(yǎng)基/Peptone Water Medium 用于靛基質(zhì)試驗(yàn) 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
KiMA(人胚腎上細(xì)胞系) 5×106cells/瓶×2 100 次 RAPD PCR 試劑盒 ( 含銀染 )
MM1-43(FM®1-43) 22-0470-1 1mg
微型離心管研磨杵 ( 無離心管 ) 80603A-50 50 只
48 T 羥脯氨酸測試盒 ( 消化法 )( 測培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)液 )
100mL 病毒沉淀劑
250 次 植物 RNAout
20U Poly(A) 聚合酶
人中性粒細(xì)胞分離液 1.085 120907-200 200mL
柱式 BAC DNAout 90607-50 50 次
200mL 人 NK 細(xì)胞分離液 1.062
50 次 磁珠植物 DNAout
250 次 細(xì) DNAout
200mL 小鼠胰島細(xì)胞分離液 1.072
肌酸激酶測試劑盒 18-0390-24 24 T
RNA 電泳液 ,10× 3150-250 250mL
1000μL 山羊抗兔 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標(biāo)記
100g DNA GuSCN( 異硫氰酸胍 )
50 次 柱式凋亡 DNAout
1mL HB101 種
Therminator γ DNA 聚合酶 130617-200 200U
電泳二甲苯藍(lán) FF 溶液，1% 100934-10 10mL
1000U T4 RNA 連接酶
25mg 蛋白酶 K
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