詳細(xì)介紹
黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雄性黃牛的皮膚組織。2004年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
MCF全細(xì)胞裂解液 100μg 100μg
Li-7(人肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Hep-2, 人喉細(xì)胞系
22RV1(人前列腺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CNE1, 人鼻咽細(xì)胞系
小鼠巨噬細(xì)胞 英文名稱: Ana-1
801-D (人巨細(xì)胞性肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BDS培養(yǎng)基/BDS Medium 擬桿菌的分離培養(yǎng) 國產(chǎn)/進口 250克
人腺細(xì)胞 英文名稱: MDA-MB-231
雙歧桿菌BS培養(yǎng)基/BS Medium 用于雙歧桿菌的分離培養(yǎng) 國產(chǎn)/進口 250克
HA標(biāo)簽免疫親和介質(zhì) 125ul 國產(chǎn)
人高轉(zhuǎn)移肺細(xì)胞 英文名稱: 95-D
DMEM培養(yǎng)基/DME培養(yǎng)基/DMEM 高糖,含丙酮酸鈉和谷氨酰胺 國產(chǎn)/進口 500ML、10升
人氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
TYGPN培養(yǎng)基/TYGPN Medium BR 國產(chǎn)/進口 250克
人肺腺細(xì)胞 英文名稱: H1299
煌綠黃胺嘧啶瓊脂/Brilliant Green Agar W/Sulfadiazine 沙門氏菌分離培養(yǎng) 國產(chǎn)/進口 250克
大鼠子宮內(nèi)膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
牛肉粉/小牛浸膏粉/小牛肉浸膏粉/牛肉膏粉/牛肉浸粉/牛肉提取物/牛肉抽提物/Beef extract powder BR 國產(chǎn)/進口 250克
5g 氨基 10B
5g Glucosamine( 胰島素抵抗誘導(dǎo)劑 )
300 次 即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒
RNase A 溶液,2mg/mL 60309-1.5 1.5mL
天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴增試劑盒 131083-20 20 次
50 只 微型離心管研磨杵 ( 無離心管 )
10mg Hoechst33342 干粉
100mg 5- 溴 -2'- 脫氧尿苷
10L DMEM( 低糖 )
黃嘌呤 CAS69-89-6 1g
骨骼肌細(xì)胞生長因子 21-0070-5 5mL
柱式骨骼 DNAout 91102-50 50 次
1000μg RecA 蛋白
25mL DEAE 瓊脂糖凝膠 6B
5次 96 孔板病毒 DNAout( 離心法 )
1000U 核酸內(nèi)切酶 III (Nth)
1,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷 CAS64431-96-5 5g
KM71 酵母種 12-269 1mL
25 T 一氧化氮檢測試劑盒 ( 硝酸還原酶法 )