荷斯坦奶牛胎兒成纖維細胞；pCSN2-HLZ價格質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

荷斯坦奶牛胎兒成纖維細胞；pCSN2-HLZ價格操作步驟：

1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 未定
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)    1mL            
牛膽鹽/Bile salt from ox    BR，60%    國產/進口    25克    
大鼠肺動脈成纖維細胞*培養(yǎng)基    100mL            
細菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基配套平皿/Total Genes Chromogenic Medium Dish        國產/進口    9㎝/塊    
Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細胞)    5×106cells/瓶×2            
P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞)    5×106cells/瓶×2            
PA317(小鼠成纖維細胞)    5×106cells/瓶×2    gersion        
MKN-28(人胃高轉移細胞)    5×106cells/瓶×2            
MDA-MB-468(人腺細胞)    5×106cells/瓶×2    gersion        
MDA-MB-453(人腺細胞)    5×106cells/瓶×2            
HIC(人小腸細胞)    5×106cells/瓶×2            
A673(人橫紋肌瘤細胞)    5×106cells/瓶×2            
CRFK(貓腎細胞)    5×106cells/瓶×2            
小鼠內臟脂肪細胞*培養(yǎng)基    100mL            
A549/DDP, 人肺腺耐藥細胞株                
食管鱗    英文名稱：        KYSE150    
5%糖發(fā)酵管/5% Lactose Ferment Broth    糖遲發(fā)酵菌種的鑒別    國產/進口    250克    
人軟骨細胞*培養(yǎng)基    100mL            
PLET瓊脂基礎/多粘菌素B溶菌酶乙二胺四乙酸乙酸亞瓊脂基礎/PLET Agar Base    炭疽桿菌的分離鑒別    國產/進口    250克    
人回盲腸細胞    英文名稱：        HCT-8   100mL    RNase-free  ,3M,pH 5.2    
200mL    人淋巴細胞分離液 1.077(FICOLL 配置 )     
過氧化氫定量分析試劑盒 ( 脂兼容性 )    18-0330-250    250 T
TAE 電泳液 ,50×    100211-250    250mL
5g    傘形酮    
100mL    DNA  CTAB 溶液，20%    
50 次    柱式 OLIGO 回收試劑盒    
1mL    Rosetta-gami B(DE3)plysS 種    
WarmStart Bst DNA 聚合酶    131162-1600    1600U
電泳過硫酸銨    100879-1    0.1gx10
10000U    T3 RNA 聚合酶    
25mg    彈性蛋白酶 ( 豬胰 )    
50 次    微量蛋白沉淀試劑盒    
100μL    小鼠抗 HA 標簽單抗    
蛋白酶 K 溶液，10mg/mL    80911-1.5    1.5mL
dNTP 溶液，100mM     51208C-5     5mL
1.5mL    甜菜堿溶液，5M，PCR     
100μL    Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )    
50 次    SP6 體外轉錄試劑盒    
500 次    阿爾瑪藍細胞增殖與細胞毒檢測試劑    
嘌呤硫    CAS321-30-2    5g
植物種屬鑒定 PCR Mix 6    131129F-100    100 次
20 次    細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 594）    
1mL    桿肽溶液 ,100mg/mL