詳細介紹
小香豬皮膚細胞;SSC-S2價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
小香豬皮膚細胞;SSC-S2價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性五指山小香豬的皮膚組織。2002年由中國科學(xué)院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
2V6.11(人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2
狗腎惡性組織細胞增生癥細胞 英文名稱: DH82
STO(小鼠胚成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2
T1N3肉湯/T1N3 Broth 霍亂弧菌的生長試驗 國產(chǎn)/進口 250克
小鼠睪間質(zhì)細胞瘤細胞 英文名稱: MLTC-1
葛根素 規(guī)格: 20mg/支;98%
人胰島β細胞*培養(yǎng)基 100mL
Fraser培養(yǎng)基/Fraser Medium 李氏菌的增菌培養(yǎng) 國產(chǎn)/進口 250克
人膚肥大細胞*培養(yǎng)基 100mL
WS瓊脂/Wuhan Salmonella Agar 分離沙門氏菌和志賀氏菌用 國產(chǎn)/進口 250克
人肺細胞 英文名稱: Calu-1
堿性蛋白胨水/3%氯化鈉堿性蛋白胨水/Alkaline Peptone Water 副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng) 國產(chǎn)/進口 250克
大鼠胰腺上細胞*培養(yǎng)基 100mL
葡萄糖半固體培養(yǎng)基/葡萄糖半固體發(fā)酵管/Dextrose Semisolid Medium 用于志賀氏菌的生化試驗 國產(chǎn)/進口 250克
大鼠表角質(zhì)形成細胞*培養(yǎng)基 100mL
血清消化粉/Serum powder BR 國產(chǎn)/進口 250克 100g 電泳尿素
少突膠質(zhì)前體細胞生長因子 21-0330-5 5mL
RNA EDTA·2Na ( 乙二胺四二 ) 101223-100 100g
250 mL PLPD 固定液
500U BglII
200mg L-NAME(eNOS 抑制劑 )
50 次 端粒酶重復(fù)片段擴增試劑盒 (TRAP)
LPS(TLR4 激活劑 ) 23-0450-0.5 0.5mg
一管式植物 DNAout 60705-50 50 次
25mg RNA Oligo(dT) 纖維素
25μL Cy5-dCTP 溶液,10mM
50 次 加 A 試劑盒
1個 15mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)
Hoechst33258 干粉 130864-10 10mg
殼聚糖磁珠 130520-2 2mL
50mg S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制劑 )
5mg Di-2-ANEPEQ
100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.0
1mL X33 酵母種
cDNA 文庫構(gòu)建試劑盒 130826-5 5次
微量 DNA 助沉劑 3621-0.1 0.1mL
20 次 雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 647·7-AAD)
5g DTT,蛋白