詳細介紹
豚鼠皮膚細胞;GP-S1價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
豚鼠皮膚細胞;GP-S1價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雌性豚鼠的皮膚組織。2001年由中國科學(xué)院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
茵陳色原酮 分子式: 316.26 分子量: C16H12O7 英文名稱: Capillarisin CAS號: 56365-38-9
它勃寧 分子式: 336.43 分子量: C21H24N2O2 英文名稱: It 40 CAS號: 4429-63-4
2,3-羥基白樺酸 分子式: 472.71 分子量: C30H48O4 英文名稱: 2,3- hydroxybetulinic acid CAS號: 85999-40-2
連翹脂苷A 分子式: 624.58714 分子量: C29H36O15 英文名稱: Forsythiaside A CAS號: 79916-77-1
甘草酸單銨鹽 分子式: 839.96 分子量: C42H65NO16 英文名稱: Mono ammonium salt CAS號: 53956-04-0
兒茶素 分子式: 290.26806 分子量: C15H14O6 英文名稱: Er CAS號: 154-23-4
白頭翁素 分子式: 192.17 分子量: C10H8O4 英文名稱: Anemonin CAS號:
鄰苯三酚紅 分子式: 400.36 分子量: C19H12O8S 英文名稱: The adjacent benzene three phenol red CAS號: 32638-88-3
溴氯酚蘭 分子式: 581.06 分子量: C19H10Br2Cl2O5S 英文名稱: Bromochlorophenol blue CAS號: 2553-71-1
酸性紅18 分子式: 604.47 分子量: C20H11N2Na3O10 英文名稱: Acid red 18 CAS號: 2611-82-7
香豆素 498 分子式: 319.38 分子量: C16H17NO4S 英文名稱: 498 CAS號: 87331-48-4
單細胞裂解液 (RNA) 130804-1 1mL
10mL 戊二醛,25% 水溶液
0.25mL GTP 溶液,100mM
10g 植酸
50 支 鼻腔采樣拭子
氯化銨 T CAS149358-73-6 5g
AH109 酵母感受態(tài)細胞 140386-10 10×100μL
5mL 星形細胞生長因子
750U 核酸外切酶 I
500mg 葡萄糖 -6- 磷酸二
48 管 DTT,免稱量蛋白
D- 半乳糖 CAS59-23-4 25g
干粉型 SB 培養(yǎng)基 100822-250 250g
25 次 一站式動物 mRNAout
5mg 堿性磷酸酶 ( 大腸桿 )
1g 環(huán)磷酰胺
100μL 山羊抗兔 IgG(Fc),堿性磷酸酶標記
甲基橙 CAS547-58-0 5g
一站式 MBP 標簽蛋白純化套裝 130871-20 20 次